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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
康朗生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清/组织/尿液
英文学名: S100A6ELISA kit
科研名称:人S100钙结合蛋白A6(S100A6)elisa定量试剂盒
实验名称:人S100钙结合蛋白A6(S100A6) ELISA试剂盒
规格:48T/96
保存:2-8℃(低温避光)
产品的用途:仅供科研ELISA检测试剂盒。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
人S100钙结合蛋白A6(S100A6)ELISA检测试剂盒(血清):血清是最常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血清析出。(最好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
(血浆):用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
(细胞培养上清):取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
人S100钙结合蛋白A6(S100A6)ELISA检测试剂盒(细胞裂解液):
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4) 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
5) 4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
(组织匀浆液):
1) 将组织样本用PBS (0.01M, PH 7.4) 冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
2) 将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
3) 将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆,例如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数)
4) 吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
人S100钙结合蛋白A6(S100A6)ELISA检测试剂盒(尿液、唾液等其他液体生物样本):1000×g离心20min,取上清即可检测。
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文献和实验Characterization of Epithelial Cells in the Hair Follicle With S100 Proteins
proteins are expressed in very restricted regions of the hair follicle: S100A3 and S100A6 in distinct postmitotic differentiated epithelial cells and S100A4 and S100A6 in the epithelial stem cell compartments. Characterization of epithelial cells
较少。研究者使用激光显微切割技术富集正常细胞和癌变的胰腺导管上皮细胞。从分离下来的细胞中分别提取蛋白,然后通过二维电泳进行分离。对二维电泳分离得到的蛋白进行银染以进行观察。当然,跑胶时确保使用相同的蛋白上样量非常关键。对比正常的和癌变的胰腺上皮细胞的蛋白图谱,发现其中九个蛋白点表达有差异。其中五个蛋白在肿瘤细胞中上调,而其中四个下调。其中一个在肿瘤细胞中表达增强的蛋白,被确定为钙结合蛋白,S100A6。 为了确定S100A6的过表达对胰腺癌的影响,我们使用了来自46个胰腺癌患者的174个重复点
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