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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
500 ml
Dulbecco‘s 改良培养基--DMEM(Dulbecco‘s Modified Eagle Medium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及Sodium pyruvate。DMEM培养基最初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。该培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产。
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文献和实验5min,弃上清,去除DMSO残留。 5.【重悬】加入1-2mL完全培养基轻轻吹打重悬;准备T25培养瓶,标注名称、代次、日期,加入4-6mL完全培养基,再加入细胞悬液,十字混匀。 6.【培养】放入37℃、5%CO2培养箱静置培养;次日换液去除死细胞碎片。 二、细胞传代 1.【实验准备】配制完全培养基:DMEM高糖(abs9483-500ml/SV30303.01)+10%FBS(abs972-500mL/SV30302.03)+1%P/S(abs9244-100ml/SV30010)。提前取出PBS
使用爱必信优级血清,用高糖 DMEM,低糖会抑制增殖。 三、细胞冻存 1.【准备工作】细胞冻存液可使用无血清细胞冻存液(abs9417-100mL),也可以自行配制:90%FBS(abs972-500mL)+10%DMSO(abs9187-100mL)。存管提前标注:细胞名称、代数、冻存人、冻存日期。生物安全柜提前使用紫外照射30min; 注意:该细胞对冻存密度敏感,建议单个皿冻存2-3只。 2.【细胞收集】细胞密度长到80%左右,按照传代步骤进行细胞收集,600rpm离心之后弃上清; 3.【细胞
丁香园myl0605的观点:前几天为自己养的PC12是未分化还是分化型困扰,查了一些资料,现发上来希望能给有同样问题的战友有一点帮助!培养条件:PC12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于CO2培养箱(37℃,95%空气5%CO2),培养基选用DMEM(pH7.4,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。分化前:PC12细胞在培养基中多呈圆形,直径15~20μm,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。分化后:加入NGF后的24h内细胞停止分裂,长出似
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