Shh/Ihh Antibody

Shh/Ihh Antibody提供各种一抗，二抗，单克隆，多克隆抗体以及不同蛋白的各种标记服务、各种纯化服务及载体蛋白连接服务，提供抗体、抗原亲和层析柱装配服务，欢迎来电咨询。
步骤：1. 分离胶和积层胶，制胶板；
注意：灌分离胶时不要加太多。
2. 蛋白变性：准备蛋白样本，Shh/Ihh Antibody加入等体积的2×上样Buffer稀释，置于沸水中煮10min（预染marker煮5min）
3. 加样：每孔加入20～40μl样品
4. 电泳：置于电泳槽中电泳45min，恒定电流90mA(2快板），如为一块板则电流为50 mA。
5. 取出胶板，用切割刀修好胶；
6. 将胶置于转膜液中浸泡；
7. 按顺序放好下列物质：黑面→海绵→滤纸→胶→NC膜→滤纸（用吸管赶去气泡）→海绵；
8. 置于转膜槽中于，黑面对黑面，加上冰块，加入转膜液；
9. 装好电极，于恒定电压100V下，90min；
10. 丽春红染膜；
11. Shh/Ihh Antibody用TBST洗去丽春红；
12. 封闭：加入5％脱脂奶粉＋TBST，常温摇床摇1h；
13. 回收封闭液，加入一抗【一抗用5％BSA＋TBS稀释】；
14. 置于4℃摇床摇过夜；
15. 回收一抗，TBST洗膜，10min，共3次；
16. 加入二抗【二抗用5％脱脂奶粉＋TBS稀释】，常温摇床摇1h；
17. 回收二抗，TBST洗膜，10min，共3次；
18. 将膜置于发光液中浸泡约1min；
19. 将膜铺于曝光盒中，于暗室中曝光，洗胶片。
大规模单克隆抗体的生产目前主要有两种方式，Shh/Ihh Antibody一是腹水制备法，另一种是转瓶培养法。腹水制备法：将杂交瘤细胞株进行体外培养至一定浓度，再将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，产生腹水，从腹水中纯化单克隆抗体。每只小鼠可以产生3~8 mL腹水，抗体含量可以达到1~10 mg/mL。腹水制备的周期为3~4周。腹水制备法具备成本低、产量高，时间快等优点，是目前主要的大规模抗体生产方式。转瓶培养法：将杂交瘤细胞进行大规模体外培养，从培养基中纯化抗体。抗体含量可以达到20~80 mg/L。转瓶制备法具有抗体品质高、不含小鼠杂蛋白，不含动物病毒等优点。
Shh/Ihh Antibody其它相关产品展示：xy-11175R Lubricin浅表层粘膜蛋白多糖抗体
xy-11200R LHX2调控胚胎干细胞分化蛋白Lhx2抗体
xy-8360R LRRC2LRRC2蛋白抗体
xy-11090R LRRC4B神经突触蛋白NGL3抗体
xy-9972R LCA5L致盲基因LCA5样蛋白抗体
xy-9973R LCA5致盲基因LCA5蛋白抗体
xy-7869R LHX6转录因子LHX6抗体
xy-7913R phospho-LATS1+LATS2 (Thr1079 +Thr1041)磷酸化肿瘤抑制基因LATS1/LATS2抗体
xy-11867R LBX1转录因子LBX1抗体
xy-11868R LDB1神经细胞特异性转录因子LDB1抗体
xy-11869R LECT2白细胞细胞化学吸引素2抗体
xy-11870R LHX5LHX5蛋白抗体
xy-11871R LIM kinase 1 + 2单丝氨酸蛋白激酶1+2抗体
xy-11872R LIN7CLIN7C蛋白抗体
xy-11873R LINGO4富含亮氨酸重复序列Nogo受体反应蛋白4抗体
xy-10536R LRG1富含亮氨酸α2糖蛋白抗体
xy-11875R LPPR4脑特异性磷脂酸磷酸酶样蛋白1抗体
xy-11876R LR8跨膜蛋白TMEM176B抗体
xy-11877R LRRTM2富含亮氨酸重复跨膜神经元蛋白2抗体
xy-11878R LRRTM4富含亮氨酸重复跨膜神经元蛋白4抗体
xy-11638R LZICLZIC蛋白抗体
xy-11879R LGI3Lgi3蛋白抗体
xy-11880R Lhx4Lhx4蛋白抗体
xy-11881R Lunatic Fringe信号转导分子SCDO3抗体
xy-10030R LEO1RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体
xy-6946R LCMV淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒蛋白抗体
xy-11731R LC3A/B自噬微管相关蛋白轻链3A/3B抗体
xy-10369R Gonadoliberin-1黄体激素释放激素/促性腺激素释放激素抗体
xy-12311R LRRC23LRRC23蛋白抗体
xy-12312R LRRC39LRRC39蛋白抗体
xy-8878R LC3自噬微管相关蛋白轻链3抗体
xy-12342R L3MBTL3L3MBTL3蛋白抗体
xy-12339R LRRC25富含亮氨酸重复蛋白25抗体