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- 2025年07月16日
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大量
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上海哈灵生物科技有限公司
BJ5183电转感受态细菌操作体会：
1. 控制好染色步骤；
2. 组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定溶液可延长或缩短染色时间； 3. 0.2%冰醋酸水溶溶液洗，可使色调清晰鲜艳；
3. 磷钼酸水溶溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。
BJ5183电转感受态细菌产品优势：
哈灵生物供应的提供该产品最新报价及使用说明书、原理、资料下载，同时我们承诺质量保证，提供实验技术支持。如产品有任何产品质量问题，无条件退换（非人为因素造成）。且我司提供的产品实验效果好，节省经费，更有上海客户免费提供送货服务，我司有完整的营销体系，保证了售前、售后问题，让您实验轻松完成。、
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文献和实验（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB
用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。 5. 胶回收线性化质粒，以备共转化使用。 二 共转化 1 大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 ² 从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB培养基中，37℃振摇过夜。 ² 接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基，37℃振摇，至OD600 达到0.4。 ² 迅速将培养物置于冰浴中30min，至充分冷却。 ²
5： 1. 重组穿梭载体的构建（酶切、连接） 2. 重组腺病毒的检测鉴定 3. 阳性CPE（荧光）图片 4. 重组穿梭载体测序问题 5. 重组腺病毒质粒Pac I 线性化纯化 Page 6： 1. 重组穿梭载体的测序 2. 穿梭载体能否用于稳定表达？ 3. 腺病毒表达的鉴定 4. 重组穿梭质粒的构建 5. 电转化感受态及电转化步骤 Page 7： 1. 重组腺病毒质粒的鉴定、纯化、转染 2. BJ5183（含/无pAdEasy-1）感受态制备 3. 碱裂解法提取腺
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