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- 2025年07月15日
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上海哈灵生物科技有限公司
PICO GREEN双链DNA荧光定量测定试剂盒操作体会：
1. 控制好染色步骤；
2. 组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定溶液可延长或缩短染色时间； 3. 0.2%冰醋酸水溶溶液洗，可使色调清晰鲜艳；
3. 磷钼酸水溶溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。
PICO GREEN双链DNA荧光定量测定试剂盒产品优势：
哈灵生物供应的提供该产品最新报价及使用说明书、原理、资料下载，同时我们承诺质量保证，提供实验技术支持。如产品有任何产品质量问题，无条件退换（非人为因素造成）。且我司提供的产品实验效果好，节省经费，更有上海客户免费提供送货服务，我司有完整的营销体系，保证了售前、售后问题，让您实验轻松完成。、
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| 蛋白酶活性定量试剂专题 | ||
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| HL50115.1.2 | 组织样品组织蛋白酶L（CATHEPSIN L）活性比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
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| HL50304.1 | 细胞血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）总活性荧光定量检测试剂盒 | 20次 |
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| HL50237.2 | 组织冠状病毒3C类蛋白酶（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性荧光淬灭法定量检测试剂盒 | 20次 |
| HL50238.1 | 细胞艾滋病毒1蛋白酶（HIV-1 PROTEASE）活性荧光淬灭法定量检测试剂盒 | 20次 |
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| HL50519.1 | 细胞艾滋病毒1蛋白酶（HIV-1 PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒 | 20次 |
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| HL50517.1 | 细胞丙型肝炎病毒蛋白酶（HCV PROTEASE）活性荧光淬灭法定量检测试剂盒 | 20次 |
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文献和实验可分为荧光探针和荧光染料。荧光探针又包括Beacon技术（分子信标技术，以美国人Tagyi为代表）、 TaqMan探针（以美国ABI公司为代表）和FRET技术（以罗氏公司为代表）等；荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料，非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ；饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。 嵌合荧光染料法（SYBR GreenⅠ）SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料，与双链DNA非特异性结合。在游离
分析.4、几个概念：（1）扩增曲线 ：（2） 荧光阈值：（3）Ct值：CT值的重现性：5、定量原理：理想的PCR反应： X=X0*2n非理想的PCR反应： X=X0 (1+Ex)nn：扩增反应的循环次数X：第n次循环后的产物量X0：初始模板量Ex：扩增效率5、标准曲线6、绝对定量1）确定未知样品的 C(t)值2）通过标准曲线由未知样品的C(t)值推算出其初始量二、实时荧光定量PCR的几种方法介绍 方法一：SYBR Green法 （一）工作原理 1、SYBR Green 能结合到双链DNA的小沟
PCR过程。（2）SYBR荧光染料法：该方法利用了SYBR Green荧光染料非特异性与双链DNA结合并发光的特性，检测PCR的全部进程，从而判定初始RNA的量。 常用的miRNA第一链合成方法成熟的miRNA大小只有22nt左右，在用实时荧光定量PCR检测miRNA时，难点在于如何识别如此小的miRNA并合成第一链。目前常用的用于识别并合成miRNA第一链的方法主要有颈环法和加尾法两种。（1）颈环法原理图（2）加尾法原理图由于成熟miRNA较小，无法用常规的方法直接进行反转录、PCR
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