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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
本产品考马斯亮蓝染色试剂盒采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
使用本试剂盒,采用常规染色脱色方法一般2-3小时后可以观察到蛋白条带;而采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。
本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性气味的乙酸。
- 考马斯亮蓝凝胶染色试剂盒使用说明:
1. 常规染色脱色方法:
a. 电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
b. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色1小时或更长时间。
注:具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚,温度较低,则染色时间宜适
当延长。凝胶较薄,温度较高,则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜
色非常接近,在染色液中几乎看不清凝胶时,可以认为已染色充分。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。
d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。
e. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次,直至蓝色背景
基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。
f. 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需
避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。
2. 快速染色脱色方法:
a. 电泳结束后,取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止
加热。
通常对于胶浓度大于10%的胶比较坚韧,在发生煮沸时不易破损;对于胶浓度小于10%的胶,宜尽
量避免煮沸,以免出现胶碎裂的情况。
b. 随后在染色液温度较高的情况下,在室温摇床上摇动5-10分钟。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。
d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保染色液可以充分覆盖凝胶。
e. 微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。
f. 随后在脱色液温度较高的情况下,在摇床上摇动5-10分钟。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白
条带。
g. 更换新鲜的脱色液,重复步骤e和步骤f,直至蓝色背景基本上全部被脱去,蛋白条带染色效果达
到预期。
h. 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需
避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。 - 考马斯亮蓝凝胶染色试剂盒
yb-12881R BPOZ伸长因子结合蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12882R BPY2睾丸特异性碱性蛋白Y2抗体 浓度1mg/ml
yb-12883R BRAF35乳腺癌易感基因2相关蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12884R Phospho-BRCA1(Ser1280)磷酸化乳腺癌易感基因1抗体 浓度1mg/ml
yb-12885R Phospho-BRCA1 (Ser1387)磷酸化乳腺癌易感基因1抗体 浓度1mg/ml
yb-12886R Phospho-E Cadherin (Ser838 + Ser840)磷酸化上皮钙粘附分子抗体 浓度1mg/ml
yb-12887R Phospho-BRCA1 (Ser1466)磷酸化乳腺癌易感基因1抗体 浓度1mg/ml
yb-12888R BRD2BRD2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12889R BRD3BRD3蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12890R phospho-Brk (Tyr447)磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/乳腺肿瘤激酶抗体 浓度1mg/ml
yb-12901R Phospho-BTK (Tyr551)磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗体 浓度1mg/ml
yb-12902R phospho-ZFP36L1 (Ser92)磷酸化EGF应答因子1抗体 浓度1mg/ml
yb-12864R Beta cellulinβ细胞素抗体 浓度1mg/ml
yb-12865R phospho-Bid (Ser78)磷酸化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12866R BIG1ARF鸟苷酸交换因子BIG1抗体 浓度1mg/ml
yb-12905R BSX脑特异性同源蛋白BSX抗体 浓度1mg/ml
yb-12906R BTB domain containing 5锌指蛋白47抗体 浓度1mg/ml
yb-12907R BTBD14ABTBD14A蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12908R BTBD15锌指蛋白851抗体 浓度1mg/ml
yb-12909R BTN2A1嗜乳脂蛋白2亚型A1抗体 浓度1mg/ml
yb-12910R Phospho-c-Fos (Ser362)磷酸化c-fos抗体 浓度1mg/ml
yb-12911R Phospho-c-Fos (Ser374)磷酸化c-fos抗体 浓度1mg/ml
yb-12913R phospho-c-Jun(Thr93)磷酸化原癌基因c-Jun抗体 浓度1mg/ml
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文献和实验0:05 无有机溶剂和醋酸时蛋白质凝胶的考马斯亮蓝G-250染色法5 0:21 内容订阅21 1:02 内容简介62 1:34 配制考马斯亮蓝染色溶液94 2:38 SDS-PAGE电泳158 4:26 凝胶染色266 6:38 代表性实验结果398 7:19 结论439 无有机溶剂和醋酸时蛋白质凝胶的考马斯亮蓝G-250染色法本视频来源于网络,如有异议请联系我们,我们将在5个工作日内作出处理。
1. 前言 通过电泳分离蛋白是蛋白质组学研究中常用的方法,因为其分辨率较高,有强大的进行凝胶对比的图像分析软件,并且与质谱技术的蛋白定性具有兼容性 [ 1,2] 。由于以上多方面原因,蛋白染色步骤显得尤为重要。 1.1 可供凝胶染色的染料 通常来说,考马斯亮蓝(CCB ) 是应用最广泛的蛋白质染料。然而,它在蛋白检测方面灵敏度较低(蛋白质的检测量为数十纳克) [ 3,4] 。它和蛋白质是通过范德华力和亲水相互作用来结合的。这种非共价结合方式使得染料能与基质辅助激光解吸电离飞行
完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析
胶内蛋白质沉淀,从而获得更好的蛋白质回收效果。不幸的是,负染色相对较贵,考马斯亮蓝染色是一种廉价蛋白质染料,被广泛用于许多实验室。因此,一种从经考马斯亮蓝染色后的凝胶中提取蛋白质的方法会是经济实惠的。 Ehring 及其合作者报道了一种从经考马斯亮蓝染色后的凝胶中提取蛋白质的被动洗脱方法。他们用蚁酸/乙腈/异丙醇/水 [ 50 : 25 : 15 : 10 ( V/V/V/V) ] 代替蚁酸/水/异丙醇。加入乙腈被认为用来提高对疏水蛋白质的洗脱效果。这种方法虽然操作简单,但只能从经考马斯亮蓝
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