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- 2025年07月07日
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- 技术资料
- 保存条件：
密封干燥保存
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6个月
- 库存：
1000
- 供应商：
钰博生物
- 细胞线粒体分离试剂盒产品简介：
1. 细胞线粒体分离试剂盒(Tissue Mitochondria Isolation Kit)是用于快速分离培养细胞线
粒体的试剂盒。
2. 本试剂盒在分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白，可用于研究细胞色素c等
线粒体蛋白向胞浆的释放。
3. 使用本试剂盒分离获得的线粒体纯度较高，并且绝大部分分离获得的线粒体都含有完整的内
膜和外膜，并具有线粒体的生理功能。因此本试剂盒分离得到的线粒体可以用于线粒体的生
理功能等方面的研究。
4. 本试剂盒分离得到的线粒体也可以被试剂盒中的线粒体裂解液或其它适当裂解液裂解后用
于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。 - 细胞线粒体分离试剂盒使用方法:
1. 准备溶液：室温融解试剂盒中的各种溶液，溶解后立即置于冰上并混匀。如果最终目的是制
备线粒体蛋白，根据样品数量，取适量相应的线粒体分离试剂备用，在线粒体分离试剂加入
到细胞样品中前数分钟内加入1:100稀释的酶抑制剂。取适量线粒体裂解液备用，在线粒体裂
解液加入到线粒体样品中前数分钟内加入1:100稀释的酶抑制剂。
2. 从组织中分离线粒体：
3. 使用新鲜的动物组织，通常要求动物处死后不超过一小时，并且保存在冰上的组织。请勿使
用经过冷冻保存的组织。
4. 剪取一小块组织，重量约为50-100mg。在1.5ml离心管内对剪取的组织进行称重。用PBS洗涤
组织一次。
5. 把组织放在一个置于冰上的离心管或培养皿中，用剪刀或刀片把组织剪切成非常细小的组织
碎片。
6. 加入10体积预冷的线粒体分离试剂A或临用前添加了1:100稀释的酶抑制剂的线粒体分离试剂
A，在冰浴上进行匀浆，匀浆10次左右。
注：如果组织的重量为50mg，可以大致认为组织的体积接近50微升，此时需加入500微升线
粒体分离试剂A。
7. 把匀浆在600g，4℃离心5分钟。
注：如需获得纯度更高的线粒体，可以将此步骤的离心速度改为1000g，其它离心条件不变；
获得更高纯度线粒体的缺点是相同数量细胞的线粒体抽提得率会下降。
8. 小心把上清转移到另一离心管中，在11000g，4℃离心10分钟。
注：如需获得纯度更高的线粒体，可以将此步骤的离心速度改为3500g，其它离心条件不变；
获得更高纯度线粒体的缺点是相同数量细胞的线粒体抽提得率会下降。
9. 小心去除上清。沉淀即为分离得到的线粒体。
注：如果希望获得去除线粒体的细胞浆蛋白，在本步骤需收集上清，并且在收集上清时注意
勿触及沉淀。随后把收集的上清12000g，4℃离心10分钟。取上清即为去除线粒体的细胞浆
蛋白。
10. 如果用于线粒体的蛋白分析，初始重量为50-100mg的组织样品分离得到的线粒体样品中可以
加入150-200微升临用前添加了1:100稀释的酶抑制剂的线粒体裂解液裂解线粒体。裂解后的
线粒体可以用于PAGE、Western、IP以及线粒体中的一些酶活性的测定等。裂解后的蛋白样
品可以使用BCA法测定蛋白浓度。
11. 如果用于双向电泳，请使用适当的用于双向电泳的裂解液处理线粒体。
细胞线粒体分离试剂盒注意事项：
1. 使用说明中的操作步骤按照组织重量为50-100mg进行说明，如果组织块较大，可以按比例加大各
溶液的使用量。
2. 分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行，所用溶液需冰浴或4℃预冷。
3. 通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g和11000g，如果希望纯度更高，但对线粒体的得
率要求不高，前后两次离心速度可以采用1000g和3500g。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 - 细胞线粒体分离试剂盒yb-3967R AMPK beta 2腺苷单磷酸活化蛋白激酶β2抗体 浓度1mg/ml
yb-5173R phospho-APC1 (Ser355)磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体 浓度1mg/ml
yb-4090R ANAPC1细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体 浓度1mg/ml
yb-4089R phospho-AKT2 (Ser474)磷酸化蛋白激酶B2抗体 浓度1mg/ml
yb-5165R phospho-APBB1 (Ser175)磷酸化铁蛋白Fe65抗体 浓度1mg/ml
yb-5166R phospho-APBB1 (Ser347)磷酸化铁蛋白Fe65抗体 浓度1mg/ml
yb-5167R phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-5168R phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser730)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-5169R phospho-ATF2 (Ser322)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-5172R phospho-ATF2 (Thr51)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-5174R phospho-APC1 (Ser377)磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体 浓度1mg/ml
yb-4091R ASAP1发育分化增强因子1抗体 浓度1mg/ml
yb-5176R phospho-ASAP1 (Tyr782)磷酸化发育分化增强因子1抗体 浓度1mg/ml
yb-5146R AKT3蛋白激酶B3 浓度1mg/ml
yb-5150R Girdin肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体 浓度1mg/ml
yb-9028R AKAP2蛋白激酶A2抗体 浓度1mg/ml
yb-2133R AT2R2血管紧张素Ⅱ受体2抗体 浓度1mg/ml
yb-9671R ASH1LASH1蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-11385R AADACL2芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体 浓度1mg/ml
yb-11388R AAMP血管内皮细胞迁移蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-6274R AKR1B10醛糖还原酶相关蛋白质抗体 浓度1mg/ml
yb-6275R AKR1C2胆汁酸结合蛋白DDH2抗体 浓度1mg/ml
yb-5918R ANGPTL3血管生成素样蛋白3抗体 浓度1mg/ml
yb-6276R Acylglycerol Kinase甘油酯激酶线粒体抗体 浓度1mg/ml
yb-6189R phospho-alpha Adducin(Ser726)磷酸化内收蛋白a1抗体 浓度1mg/ml
yb-4232R ATG16L2自噬体ATG16L2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-6289R ACPT睾丸酸性磷酸酶抗体 浓度1mg/ml
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文献和实验sumu2006 我买了细胞线粒体分离试剂盒，想用于分离血小板线粒体。 查文献发现有专门的血小板线粒体分离试剂盒。 不想浪费之前的试剂盒，不知能否用于血小板，哪位高人可以指点下？ 万分感谢！ Fasta921 两种试剂盒方法比较一下。 再根据血小板小，无核等特点作出修改！ dpw147 楼主你好，我想知道，你搞明白细胞的和血小板的线粒体分离试剂盒是否一样可用
一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，两者发射光谱不同。在正常细胞内，线粒体膜电位较高，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可产生红色荧光；凋亡早期，线粒体膜电位降低，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体
【求助】Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒的使用
mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒，想研究某种材料的细胞毒性，看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测，结果显示材料基本无毒性。 由于条件限制（流式细胞仪在我们学校另一个校区）不能及时进行检测，前两天进行了一次实验，是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理，检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态，个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关（悬浮在Annexin V结合液中
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