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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
1. 我们生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解
得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
2. RIPA即Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致
可以分为强、中、弱三类。
3. RIPA裂解液(中)的主要成分为SDS、NP-40 、sodium deoxycholate 及aprotinin等多种蛋白酶抑制
剂,可以有效抑制蛋白降解。
4. 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由
于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
- RIPA裂解液(中)使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 取适当量的 RIPA 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF(货号 WB0114),使 PMSF 的最终
浓度为 1mM。
2. 对于贴壁细胞,去除培养液用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪吹打
数下,使裂解液和细胞充分接触,轻轻的摇晃约 5-10 分钟,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,
取上清,即可进行后续操作。
裂解液用量说明: 用于不同规格标准培养板裂解液容量
板规格/表面积 试剂容量
100mm 500-1000μι
60mm 250-500μι
6-well plate 200-400μιper well
24-well plate 100-200μιper well
96-well plate 50-100μιper well
3. 对于悬浮细胞,离心收集细胞,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,加入适量裂解液,用枪
吹打把细胞吹散,用手指轻弹或旋涡震荡 5-10 分钟以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞
沉淀。如果细胞量较多,必需分装然后再裂解,充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,取上清,
即可进行后续操作。
RIPA裂解液(中)对于组织样品:
1.手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成
几个较小的组织块放入组织匀浆器中。
2. 取适当量的 RIPA 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。
3. 按组织净重(g):裂解液(ml)=1:10 的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆(如果裂解不充分可
以适当添加更多的裂解液 如果需要高浓度的蛋白样品 可以适当减少裂解液的用量) 。
4. 用匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3- 5 分钟,取上清,即可进行后续作。
注:RIPA 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基
因组 DNA 等的复合物。 - RIPA裂解液(中)
yb-2771R AMPK alpha 2腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 浓度1mg/ml
yb-2778R ADK腺苷酸激酶抗体 浓度1mg/ml
yb-13780R A2ML1α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1 浓度1mg/ml
yb-13814R APR3细胞凋亡相关蛋白3抗体 浓度1mg/ml
yb-10196R Actin肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体 浓度1mg/ml
yb-12331R ABCB7ATP结合蛋白家族7抗体 浓度1mg/ml
yb-12349R ASCL2ASCL2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12534R phospho-Ataxin 1(Ser775)磷酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-12535R phospho-ATF1 (Ser63)磷酸化活化转录因子1抗体 浓度1mg/ml
yb-12536R phospho-ATF2 (Ser480)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-12537R phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-12538R phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-12539R phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-12541R phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-12540R phospho-ATF2(Thr71)磷酸化活化复制因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-12542R ATF5活化转录因子5抗体 浓度1mg/ml
yb-12543R ATF6 beta活化转录因子6β抗体 浓度1mg/ml
yb-12544R ATICAICAR甲酰基转移酶抗体 浓度1mg/ml
yb-12545R phospho-ATM (Ser794)磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12546R ATP5EATP5E蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12547R ATP5G2ATP5G2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12548R ATP6V0D2ATP6V0D2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12549R ATP6V1B2ATP6V1B2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12550R ATPIF1ATPIF1蛋白抗体 浓度1mg/ml
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文献和实验1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g (1%)0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml (1%)Aprotinin
师赠王老吉 在提取血中DNA时,细胞裂解液是指?平常的细胞裂解液,还是白细胞或者红细胞的裂解液? liushan8_9 白细胞或者红细胞的细胞膜应该是一样的吧。 yyf87255300 在提取外周血DNA时,成熟的红细胞内没有核,所以裂解的外周血的白细胞,我们实验室用的裂解液是三蒸水 zjubell 师赠王老吉 wrote:
-3, caspase-7, parp and GD1 检测➤ 主要发现p24, p20 存在于 RIPA 提取的蛋白中,但 Laemmli 裂解液提取的蛋白中却不存在。证明了 RIPA buffer 提取蛋白时会人工激活 caspase-3 and caspase-7。用 Laemmli 缓冲液加超声处理可进一步从 RIPA 不可溶性组分中提取出蛋白。例二.Kevin A. Janes,(2016).An Analysis of Critical Factors for Quantitative
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