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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
- NP-40裂解液产品简介:
1. NP-40裂解液(NP-40 Lysis Buffer)是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40裂解液裂解得到的
蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
2. NP-40裂解液的主要成分为 Tris,NaCl,NP-40以及leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白
降解。
3. 用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较
高浓度的去垢剂, 不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度,可以用我们生产
的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。 - NP-40裂解液使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 取适当量的 NP-40 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。
2. 对于贴壁细胞,去除培养液用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液。用枪
吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。轻轻的摇晃约 5-10 分钟。充分裂解后,10000-14000g
离心 10 分钟,取上清,即可进行后续操作。
裂解液用量说明: 用于不同规格标准培养板裂解液容量
板规格/表面积 试剂容量
100mm 500-1000μι
60mm 250-500μι
6-well plate 200-400μιper well
24-well plate 100-200μιper well
96-well plate 50-100μιper well
3. 对于悬浮细胞,离心收集细胞,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适量裂解液用枪吹
打把细胞吹散。用手指轻弹或旋涡震荡 5-10 分钟以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉
淀。如果细胞量较多,必需分装然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g 离心 10 分钟,取上清,即
可进行后续操作。
对于组织样品:
1.手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切
成几个较小的组织块放入组织匀浆器中。
2. 取适当量的 NP-40 裂解液混匀,在使用前数分钟内加入 PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。
3. 按组织净重(g):裂解液(ml)=1:10 的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆(如果裂解不充
分可以适当添加更多的裂解液 如果需要高浓度的蛋白样品 可以适当减少裂解液的用量) 。
4. 用玻璃匀浆器匀浆直至充分裂解。
5. 充分裂解后10000-14000g 离心 3- 5 分钟取上清即可进行后续作。
注:NP-40 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基
因组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上
清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明
胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NF-kappaB、p53 等时,
通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
NP-40裂解液注意事项:
1. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。建议将样品分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接
以液体状态置-20℃中保存,不要反复冻融。
2. 需自备 PMSF。建议在临用前数分钟内加入 PMSF - NP-40裂解液yb-9748R ANKRD22锚蛋白重复结构域蛋白22抗体 浓度1mg/ml
yb-9751R ANKRD50锚蛋白重复结构域蛋白50抗体 浓度1mg/ml
yb-9753R ATP6V1G2氢离子转运ATP合成酶6G抗体 浓度1mg/ml
yb-9755R ANKRD26锚蛋白重复结构域蛋白26抗体 浓度1mg/ml
yb-9756R ANKRD26锚蛋白重复结构域蛋白26抗体 浓度1mg/ml
yb-0728R ACY3丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体 浓度1mg/ml
yb-9102R ARSK芳香基硫酸酯酶K抗体 浓度1mg/ml
yb-2409R Amphiphysin神经元突触前膜蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-2415R Ankyrin G锚定蛋白G抗体 浓度1mg/ml
yb-0189R Actin肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体 浓度1mg/ml
yb-1208R ADAMTS1整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型抗体 浓度1mg/ml
yb-0733R ADAMTS7(NT)整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体 (N端抗体) 浓度1mg/ml
yb-0433R ADAMTS7整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体 浓度1mg/ml
yb-1114R beta Adducin内收蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-1164R ADFP脂肪组织分化相关蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-0610R Adiponectin Receptor 1脂联素受体1抗体 浓度1mg/ml
yb-0090R ADM R肾上腺髓质素受体抗体 浓度1mg/ml
yb-0471R Adiponectin脂联素抗体 浓度1mg/ml
yb-0007R ADM肾上腺髓质素抗体 浓度1mg/ml
yb-1225R Adenosine A3 Receptor腺苷受体A3抗体 浓度1mg/ml
yb-1062R ADRA2ADRA2肾上腺素能受体2抗体 浓度1mg/ml
yb-0498R ADRB1肾上腺素能受体β1抗体 浓度1mg/ml
yb-0947R ADRB2肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体 浓度1mg/ml
yb-1158R AGEs晚期糖基化终末产物抗体 浓度1mg/ml
yb-1223R Aggrecan1软骨蛋白聚糖抗体 浓度1mg/ml
yb-9516R ALAS-E5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-1282R ASPP1p53凋亡刺激蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-1283R ASPP2P53凋亡刺激蛋白2抗体 浓度1mg/ml
yb-0801R ARIP2B激活素受体2B抗体 浓度1mg/ml
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