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100
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上海乔羽生物有限公司
- 规格:
100ml/200ml/500ml
山羊IgG预装亲和柱
产品货号:QY-ES519
山羊IgG预装亲和柱产品使用注意事项(仅供参考):
1.血清解冻最好采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。
2.血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。
3.热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。
4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。
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文献和实验1. 去垢剂类型和特点表 常用的去垢剂大概有十几种,根据膜蛋白分子量可选用下面两根预装柱进行快速筛选: 表 2. 用两根预装柱快速筛选去垢剂结果表 运行流速设为 0.5 mL/min,15 min 以内就可以筛选一个去垢剂,而且上样量 5-50μL,可节省样品。 标签 摸索得到合适的去垢剂之后,就可以进行常规的层析实验。 增溶之后,高速离心取上清过亲和层析柱,为了减少后续的处理步骤,往往设计较小的标签,一般使用 HIS 或者 Strep,如果使用 GST 标签,则需要引入酶切位点。 标签
蛋白洗脱液; 浓缩后上样进行最后一步分子筛精纯,使用高分辨率层析柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL,以得到高均一性和高纯度的 OmpA,利于后续的结构解析。 翻过膜蛋白纯化这座大山,以后纯化尽是坦途。 跃跃欲试了吗?那就去九大层析应用活动中先寻找心仪的装备吧! Cytiva针对9种不同纯化应用,推出相应的层析组合产品,订购推荐的两步纯化或三步纯化套餐,即可获得精选填料或预装柱一份(52 种,任您选择),加速您的蛋白质研究! 详情请查看
一、材料和方法1.试剂及耗材蛋白抽提试剂(改进型RIPA配方)BCA蛋白定量试剂盒5×还原样品缓冲液10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液考马斯亮蓝染色液10×TBST pH8.0湿转缓冲液PVDF膜,0.22um孔径丽春红染色液PMSF蛋白酶抑制剂封闭液ECL发光液山羊抗兔IgG(H+L),HRP兔抗山羊IgG(H+L),HRPβ-actin 鼠单抗2.实验仪器Fresco低温冷冻离心机MultiSkan3酶标仪电泳槽湿转电泳槽电泳仪水平脱色摇床 二、 实验方法及结果3.1细胞
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