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密封干燥保存
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6个月
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GAL4 luciferase reporter plasmid
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1000
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钰博生物
GAL4荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(GAL4 luciferase reporter plasimd)是钰博生物自主研发的用于检测GAL4转录活性水平为目的的报告基因。GAL4是酵母(Saccharomyces cerevisiae)转录激活蛋白,是酵母半乳糖的代谢相关基因。
GAL4报告基因主要用于检测蛋白质相互作用的酵母双杂交系统,以及在其基础上发展出来的用于检测Protein-DNA相互作用的酵母单杂交系统和酵母三杂交系统。
pGMGAL4-Lu是钰博生物改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个GAL4结合位点,可以高灵敏度地检测GAL4的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得GAL4报告基因质粒更易于转染。
GAL4 luciferase reporter plasmid (GAL4-Luc荧光素酶报告基因质粒)
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。收到产品后放到-20 ºC保存。
注意事项
本质粒未经钰博生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
GAL4 luciferase reporter plasmid (GAL4-Luc荧光素酶报告基因质粒)使用说明
pGMGAL4-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
参考文献
[1] Goto T, et al. Bixin Activates PPARα and Improves Obesity-Induced Abnormalities of Carbohydrate and Lipid Metabolism in Mice. J Agric Food Chem. 2012 Dec 5;60(48):11952-8.
[2] Lucas-Hourani M, et al. A Phenotypic Assay to Identify Chikungunya Virus Inhibitors Targeting the Nonstructural Protein nsP2. J Biomol Screen.2012 Sep 14.
[3] Lim B, et al.The TFG-TEC fusion gene created by the translocation in human extraskeletalmy xoid chondrosarcomas encodes a more potent transcriptional activator than TEC. Carcinogenesis. 2012 Aug;33(8):1450-8.
[4] Kim JH, et al. Biochemical characterization of human Ecdysoneless reveals a role in transcriptional regulation.
Biol Chem. 2010 Jan;391(1):9-19.
GAL4 luciferase reporter plasmid (GAL4-Luc荧光素酶报告基因质粒)yb-1289 L6(大鼠成肌细胞 )
yb-1290 H9c2(2-1)(大鼠心肌细胞)
yb-1291 RSC96(大鼠雪旺细胞)
yb-1292 CHO/dhFr-(中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞)
yb-1293 Lec1(卵巢细胞)
yb-1294 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)
yb-1295 AAV-293( 胚肾细胞 )
yb-1296 hFOB 1.19(SV40 转染成骨细胞)
yb-1297 CCD-1095Sk(皮肤细胞 )
yb-1298 Hs 578Bst(乳腺细胞)
yb-1299 NK-92(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
yb-1300 NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
yb-1301 HMy2.CIR(人B 淋巴母细胞)
yb-1302 OK(负鼠(opossum)肾细胞)
yb-1303 FO(骨髓瘤细胞)
yb-1304 RAW 264.7(单核巨噬细胞白血病)
yb-1305 P19(畸胎癌细胞)
yb-1306 C6(胶质瘤细胞)
yb-1307 RBL-2H3(白血病细胞)
yb-1308 SiHa(子宫颈癌细胞)
yb-1309 MG-63(骨肉瘤细胞)
yb-1310 HEC-1-B(子宫内膜腺癌细胞)
yb-1311 SW1353(骨肉瘤细胞)
yb-1312 ES-2(卵巢透明细胞癌细胞)
yb-1313 Saos-2(成骨肉瘤细胞)
yb-1314 MDA-MB-468(乳腺癌细胞)
yb-1315 SK-MES-1(肺鳞癌细胞)
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文献和实验啦! 呵呵,以前看到过有人把NOTCH1的intracellular domain连上GAL4-VP16,然后共转UAS-Reporter。相当于一个直接结合的报告基因系统。UAS-Reporter可以改造pG5Luc载体。 NLS序列在pACT的vp16AD或者pGADT7的gal4AD的上游处,都是SV40NLS,说明书上就有。 呵呵,我不知道常用载体里有没有不带NLS的GAL4序列。GAL4-UAS系统思路及经典文献可以参考93年development
Measurement of Mouse Cytomegalovirus-Induced Interferon- with Immortalized Luciferase Reporter Cells
(MCMV) infection of immortalized fibroblasts derived from mice expressing the firefly luciferase reporter downstream of the IFN-β promoter. Common methods to determine IFN-β production, including ELISA, quantitative real-time PCR (qPCR), and transient
(upstreamactivating sequence)DNA 区域,在 AD 结构域可以激活 UAS 下游的基因表达。因此,他们把 GAL4 的两个结构域切分开,这样,BD 可以与目标蛋白结合,并且先行结合在报告基因 lacZ 上游的 UAS 区域,接着,把需要检验是否与目标蛋白相互作用的蛋白与 AD 结构域融合表达,如果目标蛋白和被检测蛋白可以相互作用,它们必定会在空间上相互接近彼此,这种相互作用可以使得 AD 和 BD 结构域也在空间上相互接近,这样就可以激活报告基因 lacZ 的表达,使得人们可以检测到,如图 1 所示
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