DH5α Chemically Competent Cell

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞产品描述

本品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选，另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性。

DH5α感受态细胞基因型：F-φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-arg ) U169 endA1 recA1 hsdR17 (rk-, mk+) phoA supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11802ES76（100 μl × 5管）

11802ES80（100 μl × 10管）

11802-A

DH5α感受态细胞

100 μl × 5

100 μl × 10

11802-B

pUC19（0.1 ng/μl）

5 μl × 1

5 μl × 1

运输与保存方法

干冰运输。

DH5α感受态细胞-80℃保存，pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。

注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3) 为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。

4) 为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，最低化实验可能遇到的风险。

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞使用方法

1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

注：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用，应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

2) 向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。

3) 将离心管置于42℃水浴中放置45s~60s，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2min，该过程不要摇动离心管。

4) 向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min~60min（150 rpm）， 目的是促使菌体复苏，抗性基因表达。

5) 将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，37℃培养12-16 h。

注：涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存，一周之内可重新涂板。

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞

附录一：常用抗生素工作浓度

抗生素

翊圣货号

常用工作浓度

Ampicillin 氨苄青霉素

60203ES10

100 μg/ml

Carbenicillin羧苄青霉素

60202ES08

100 μg/ml

Chloramphenicol 氯霉素

60205ES10

33 μg/ml

Kanamycin 卡那霉素

60206ES10

30 μg/ml

Streptomycin 链霉亲和素

60211ES60

25 μg/ml

Tetracycline 四环素

60212ES25

15 μg/ml

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞yb-hxbz-316 人宫颈癌细胞(HPV-18 永生化细胞) HeLa229 规格25毫升/株.
yb-hxbz-317 人宫颈癌细胞 Hela P10s-11F 规格25毫升/株.
yb-hxbz-318 人宫颈癌细胞 HeLa-S3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-319 人宫颈癌细胞 SiHa 规格25毫升/株.
yb-hxbz-320 宫颈癌细胞 HCE1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-321 人宫颈癌细胞 CaSKi 规格25毫升/株.
yb-hxbz-322 人子宫内膜癌细胞 RL95-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-323 人子宫鳞癌细胞（高分化） HCC 94 规格25毫升/株.
yb-hxbz-324 人子宫颈癌细胞 C-33A 规格25毫升/株.
yb-hxbz-325 人前列腺癌细胞 PC-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-326 人前列腺癌细胞 PC-3M 规格25毫升/株.
yb-hxbz-327 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 1E8 规格25毫升/株.
yb-hxbz-328 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 2B4 规格25毫升/株.
yb-hxbz-329 人前列腺癌细胞 DU-145 规格25毫升/株.
yb-hxbz-330 人前列腺癌细胞 UI-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-331 人前列腺癌细胞 22RV1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-332 前列腺癌细胞 LncaP 规格25毫升/株.
yb-hxbz-333 非雄激素依赖型前列腺癌 Tsu-Prl 规格25毫升/株.
yb-hxbz-334 人胎盘绒毛癌细胞 JAR 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-hxbz-335 人绒癌细胞 JEG-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-336 人绒毛膜癌 JEG 规格25毫升/株.
yb-hxbz-337 人胎盘绒膜癌细胞 BeWo 规格25毫升/株.
yb-hxbz-338 人绒癌细胞耐药株 JEG-3/VP16 规格25毫升/株.
yb-hxbz-339 白介素-2转染耐VP16绒癌细胞 JEG-3/VP16-IL-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-340 TNFa转染耐VP16绒癌细胞 JEG-3-VP16-TNFa 规格25毫升/株.