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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
JM109 Chemically Competent Cell
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
在基因重组实验中,常使用感受态细胞摄取外源DNA以制备基因文库、重组质粒以及进行亚克隆等。
本品是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。经使用pUC19质粒检测,本品转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性以及更有利于高纯度质粒DNA的提取。
JM109感受态细胞基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 e14-(mcrA-) supE44 relA1 △(lac-proAB)/F’ [traD36 proAB+ lac Iq lacZ △M15]。
产品组分
组分编号
组分名称
产品编号/规格
11807ES76(100 μl × 5管)
11807ES80(100 μl × 10管)
11807-A
JM109感受态细胞
100 μl × 5
100 μl × 10
11807-B
pUC19(0.1 ng/μl)
5 μl × 1
5 μl × 1
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞运输与保存方法
干冰运输。
JM109感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。
注意事项
1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,避免移液枪吹吸。
4) 为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2) 向100 μl感受态细胞悬液中加入2-10μl目的DNA或连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置20min。
3) 将离心管置于42℃水浴中放置90s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。
4) 向离心管中加入500μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养60min(200 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。
5) 将离心管内容物混匀,根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞附录一:常用抗生素工作浓度
抗生素
翊圣货号
常用工作浓度
Ampicillin 氨苄青霉素
60203ES10
100 μg/ml
Carbenicillin羧苄青霉素
60202ES08
100 μg/ml
Chloramphenicol 氯霉素
60205ES10
33 μg/ml
Kanamycin 卡那霉素
60206ES10
30 μg/ml
Streptomycin 链霉亲和素
60211ES60
25 μg/ml
Tetracycline 四环素
60212ES25
15 μg/ml
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞yb-hxbz-291 人卵巢癌细胞 A2780 规格25毫升/株.
yb-hxbz-292 人卵巢癌细胞 Sw626 规格25毫升/株.
yb-hxbz-293 人卵巢癌顺铂耐药株 COC1/CDDP 规格25毫升/株.
yb-hxbz-294 人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/Taxol 规格25毫升/株.
yb-hxbz-295 人卵巢癌细胞系 Anglne 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-hxbz-296 人卵巢癌细胞 OVCaR-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-297 人卵巢癌细胞 Caov-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-298 人卵巢癌细胞 HO-8910 规格25毫升/株.
yb-hxbz-299 人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-300 人卵巢癌细胞 8910PM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-301 人卵巢癌细胞 HOC1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-302 人卵巢癌细胞 COC1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-303 人卵巢癌细胞 OVAC 规格25毫升/株.
yb-hxbz-304 人卵巢癌细胞 Ovary 规格25毫升/株.
yb-hxbz-305 人卵巢畸胎瘤细胞 PA-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-306 人卵巢癌细胞 SK-OV-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-307 人卵巢透明细胞癌细胞 ES-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-308 人卵巢癌细胞系 3AO 规格25毫升/株.
yb-hxbz-309 人子宫内膜癌细胞 ISK (Ishikawa) 规格25毫升/株.
yb-hxbz-310 人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A 规格25毫升/株.
yb-hxbz-311 人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-B 规格25毫升/株.
yb-hxbz-312 人子宫内膜腺癌细胞 AN3 CA 规格25毫升/株.
yb-hxbz-313 人子宫内膜腺癌细胞 KLE 规格25毫升/株.
yb-hxbz-314 人宫颈癌细胞 HeLa 规格25毫升/株.
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文献和实验Preparing chemically competent cells
Materials Plate of cells to be made competent TSS buffer LB media Ice Glassware & Equipment Falcon tubes 500μl Eppendorf tubes, on ice 200ml conical flask 200μl pipetman or repeating
TOP10 chemically competent cells
Detergent is a major inhibitor of competent cell growth and transformation. Glass and plastic must be detergent free for these protocols. The easiest way to do this is to avoid washing glassware, and simply rinse it out. Autoclaving glassware filled
CCMB buffer to make chemical competent cell
TOP10 chemically competent cells ( modified from http://openwetware.org/wiki/TOP10_chemically_competent_cells#CCMB80_buffer) I also use this protocol to make Ecoli compent cell. It is pretty good. You can start from the fresh clone on plate
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









