JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞

JM109 Chemically Competent Cel

l JM109化学感受态细胞
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  • 上海钰博
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  • YB11807ES76
  • 2025年07月15日
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      密封干燥保存

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      6个月

    • 英文名

      JM109 Chemically Competent Cell

    • 库存

      1000

    • 供应商

      钰博生物

    JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞产品描述

    在基因重组实验中,常使用感受态细胞摄取外源DNA以制备基因文库、重组质粒以及进行亚克隆等。

    本品是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。经使用pUC19质粒检测,本品转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性以及更有利于高纯度质粒DNA的提取。

    JM109感受态细胞基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 e14-(mcrA-) supE44 relA1 △(lac-proAB)/F’ [traD36 proAB+ lac Iq lacZ △M15]。

    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    11807ES76(100 μl × 5管)

    11807ES80(100 μl × 10管)

    11807-A

    JM109感受态细胞

    100 μl × 5

    100 μl × 10

    11807-B

    pUC19(0.1 ng/μl)

    5 μl × 1

    5 μl × 1

    JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞运输与保存方法

    干冰运输。

    JM109感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。

    注意事项

    1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

    2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

    3) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,避免移液枪吹吸。

    4) 为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。

    使用方法

    1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

    2) 向100 μl感受态细胞悬液中加入2-10μl目的DNA或连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置20min。

    3) 将离心管置于42℃水浴中放置90s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。

    4) 向离心管中加入500μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养60min(200 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。

    5) 将离心管内容物混匀,根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。

    JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞附录一:常用抗生素工作浓度

    抗生素

    翊圣货号

    常用工作浓度

    Ampicillin 氨苄青霉素

    60203ES10

    100 μg/ml

    Carbenicillin羧苄青霉素

    60202ES08

    100 μg/ml

    Chloramphenicol 氯霉素

    60205ES10

    33 μg/ml

    Kanamycin 卡那霉素

    60206ES10

    30 μg/ml

    Streptomycin 链霉亲和素

    60211ES60

    25 μg/ml

    Tetracycline 四环素

    60212ES25

    15 μg/ml

    JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞yb-hxbz-291 人卵巢癌细胞 A2780 规格25毫升/株.
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    yb-hxbz-294 人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/Taxol 规格25毫升/株.
    yb-hxbz-295 人卵巢癌细胞系 Anglne 规格25毫升/株.
    编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
    yb-hxbz-296 人卵巢癌细胞 OVCaR-3 规格25毫升/株.
    yb-hxbz-297 人卵巢癌细胞 Caov-3 规格25毫升/株.
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    yb-hxbz-299 人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 规格25毫升/株.
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    yb-hxbz-304 人卵巢癌细胞 Ovary 规格25毫升/株.
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