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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
JM109 Chemically Competent Cell
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞产品描述
在基因重组实验中,常使用感受态细胞摄取外源DNA以制备基因文库、重组质粒以及进行亚克隆等。
本品是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。经使用pUC19质粒检测,本品转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性以及更有利于高纯度质粒DNA的提取。
JM109感受态细胞基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 e14-(mcrA-) supE44 relA1 △(lac-proAB)/F’ [traD36 proAB+ lac Iq lacZ △M15]。
产品组分
组分编号
组分名称
产品编号/规格
11807ES76(100 μl × 5管)
11807ES80(100 μl × 10管)
11807-A
JM109感受态细胞
100 μl × 5
100 μl × 10
11807-B
pUC19(0.1 ng/μl)
5 μl × 1
5 μl × 1
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞运输与保存方法
干冰运输。
JM109感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。
注意事项
1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,避免移液枪吹吸。
4) 为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2) 向100 μl感受态细胞悬液中加入2-10μl目的DNA或连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置20min。
3) 将离心管置于42℃水浴中放置90s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。
4) 向离心管中加入500μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养60min(200 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。
5) 将离心管内容物混匀,根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞附录一:常用抗生素工作浓度
抗生素
翊圣货号
常用工作浓度
Ampicillin 氨苄青霉素
60203ES10
100 μg/ml
Carbenicillin羧苄青霉素
60202ES08
100 μg/ml
Chloramphenicol 氯霉素
60205ES10
33 μg/ml
Kanamycin 卡那霉素
60206ES10
30 μg/ml
Streptomycin 链霉亲和素
60211ES60
25 μg/ml
Tetracycline 四环素
60212ES25
15 μg/ml
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞yb-hxbz-291 人卵巢癌细胞 A2780 规格25毫升/株.
yb-hxbz-292 人卵巢癌细胞 Sw626 规格25毫升/株.
yb-hxbz-293 人卵巢癌顺铂耐药株 COC1/CDDP 规格25毫升/株.
yb-hxbz-294 人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/Taxol 规格25毫升/株.
yb-hxbz-295 人卵巢癌细胞系 Anglne 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-hxbz-296 人卵巢癌细胞 OVCaR-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-297 人卵巢癌细胞 Caov-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-298 人卵巢癌细胞 HO-8910 规格25毫升/株.
yb-hxbz-299 人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-300 人卵巢癌细胞 8910PM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-301 人卵巢癌细胞 HOC1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-302 人卵巢癌细胞 COC1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-303 人卵巢癌细胞 OVAC 规格25毫升/株.
yb-hxbz-304 人卵巢癌细胞 Ovary 规格25毫升/株.
yb-hxbz-305 人卵巢畸胎瘤细胞 PA-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-306 人卵巢癌细胞 SK-OV-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-307 人卵巢透明细胞癌细胞 ES-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-308 人卵巢癌细胞系 3AO 规格25毫升/株.
yb-hxbz-309 人子宫内膜癌细胞 ISK (Ishikawa) 规格25毫升/株.
yb-hxbz-310 人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A 规格25毫升/株.
yb-hxbz-311 人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-B 规格25毫升/株.
yb-hxbz-312 人子宫内膜腺癌细胞 AN3 CA 规格25毫升/株.
yb-hxbz-313 人子宫内膜腺癌细胞 KLE 规格25毫升/株.
yb-hxbz-314 人宫颈癌细胞 HeLa 规格25毫升/株.
在基因重组实验中,常使用感受态细胞摄取外源DNA以制备基因文库、重组质粒以及进行亚克隆等。
本品是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。经使用pUC19质粒检测,本品转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性以及更有利于高纯度质粒DNA的提取。
JM109感受态细胞基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 e14-(mcrA-) supE44 relA1 △(lac-proAB)/F’ [traD36 proAB+ lac Iq lacZ △M15]。
产品组分
组分编号
组分名称
产品编号/规格
11807ES76(100 μl × 5管)
11807ES80(100 μl × 10管)
11807-A
JM109感受态细胞
100 μl × 5
100 μl × 10
11807-B
pUC19(0.1 ng/μl)
5 μl × 1
5 μl × 1
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞运输与保存方法
干冰运输。
JM109感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。
注意事项
1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,避免移液枪吹吸。
4) 为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2) 向100 μl感受态细胞悬液中加入2-10μl目的DNA或连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置20min。
3) 将离心管置于42℃水浴中放置90s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。
4) 向离心管中加入500μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养60min(200 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。
5) 将离心管内容物混匀,根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞附录一:常用抗生素工作浓度
抗生素
翊圣货号
常用工作浓度
Ampicillin 氨苄青霉素
60203ES10
100 μg/ml
Carbenicillin羧苄青霉素
60202ES08
100 μg/ml
Chloramphenicol 氯霉素
60205ES10
33 μg/ml
Kanamycin 卡那霉素
60206ES10
30 μg/ml
Streptomycin 链霉亲和素
60211ES60
25 μg/ml
Tetracycline 四环素
60212ES25
15 μg/ml
JM109 Chemically Competent Cell JM109化学感受态细胞yb-hxbz-291 人卵巢癌细胞 A2780 规格25毫升/株.
yb-hxbz-292 人卵巢癌细胞 Sw626 规格25毫升/株.
yb-hxbz-293 人卵巢癌顺铂耐药株 COC1/CDDP 规格25毫升/株.
yb-hxbz-294 人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/Taxol 规格25毫升/株.
yb-hxbz-295 人卵巢癌细胞系 Anglne 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-hxbz-296 人卵巢癌细胞 OVCaR-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-297 人卵巢癌细胞 Caov-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-298 人卵巢癌细胞 HO-8910 规格25毫升/株.
yb-hxbz-299 人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-300 人卵巢癌细胞 8910PM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-301 人卵巢癌细胞 HOC1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-302 人卵巢癌细胞 COC1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-303 人卵巢癌细胞 OVAC 规格25毫升/株.
yb-hxbz-304 人卵巢癌细胞 Ovary 规格25毫升/株.
yb-hxbz-305 人卵巢畸胎瘤细胞 PA-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-306 人卵巢癌细胞 SK-OV-3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-307 人卵巢透明细胞癌细胞 ES-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-308 人卵巢癌细胞系 3AO 规格25毫升/株.
yb-hxbz-309 人子宫内膜癌细胞 ISK (Ishikawa) 规格25毫升/株.
yb-hxbz-310 人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A 规格25毫升/株.
yb-hxbz-311 人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-B 规格25毫升/株.
yb-hxbz-312 人子宫内膜腺癌细胞 AN3 CA 规格25毫升/株.
yb-hxbz-313 人子宫内膜腺癌细胞 KLE 规格25毫升/株.
yb-hxbz-314 人宫颈癌细胞 HeLa 规格25毫升/株.
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