人前列腺微血管内皮细胞cDNA

大鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养

脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障（blood-brain barrier，BBB）的重要成分，与外周血管内皮细胞不同，它具有高跨内皮阻抗（transendothelial electrical resistance，TER）、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择性双向跨细胞膜转运系统等独有的特征，从而使血脑屏障形成一个限制大多数极性分子和蛋白质运动的选择性低渗透性的屏障[1]。由于体外培养的脑微血管内皮细胞保持了较多的其体内固有的特点[1]，因此目前脑微血管内皮细胞

原代微血管内皮细胞的体外分离培养

，成纤维细胞基本可以被除去。 4、微血管内皮细胞的鉴定到目前为止，还没有发现不同器官组织的微血管内皮细胞具有共同的特异蛋白或标志。 微血管内皮细胞的鉴定：（1）根据器官和组织的起源，从形态、表型、生化和功能等方面进行综合评价。（2）微血管内皮细胞一般呈单层生长，有接触抑制现象，呈典型的铺路石状，电镜下可以看到Weibel-Palade小体。（3）表面表达CD31、CD34、凝血调节蛋白、第Ⅷ因子和选择素等，细胞可摄取低密度脂蛋白，产生前列腺素，内吞功能，结合植物血凝素，形成毛细血管样网络。5、微血管内皮细胞

正常大兔脑微血管内皮细胞的培养

。经孔径为110μm尼龙筛网过滤，将滤液以4000r/min离心10min； 4. 弃离心后的上清液。给沉淀加入15%右旋糖苷溶液，重新悬浮沉淀。然后，再以4000r/min离心20min。收集微血管片段； 5. 用0.05%胶原酶溶液消化2—4h。用Hanks液洗涤并离心，给微血管片段加入M199培养液； 6. 接种到培养瓶中，置37℃、5%CO2 的培养箱中（湿度100%）培养 7. 24h后换液，将未贴壁的微血管段移入其它培养瓶或皿中继续贴壁生长。之后，每3d换液