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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
上海钰博
- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
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- 免疫类型:
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- 细胞形态:
上皮样
- 是否是肿瘤细胞:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
干冰运输
- 生长状态:
贴壁生长
LysoTracker®系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料,该类探针具有几大重要的特点,1)选择性标记酸性细胞器;2)纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞;3)具有多色探针提供,可根据情况对样品进行多标实验。LysoTracker®结构上由一个荧光基团和相连的弱碱基构成,可自由穿过细胞膜,一般聚集在球形细胞器上,适用于观察溶酶体内部生物合成及相关发病机理。Lysotracker中性pH下仅仅发生部分质子化,因此该探针标记细胞器的原理可能与其完全质子化并滞留在细胞器膜上有关。
本品LysoTracker® Green DND-26为绿色荧光标记的溶酶体探针,具有504/511nm的最大激发/发射波长。本品以溶于无水DMSO的1mM储存液形式提供。
LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针产品性质
CAS号(CAS NO.)
N/A
分子式(Formula)
C18H26BClF2N4O
分子量(Molecular Weight)
398.6894
Ex/Em(nm)
504/511
外观(Appearance)
黄色溶液
结构式(Structure)
运输和保存方法
室温运输。-20℃避光保存,避免反复冻融。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1. 工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50-75nM;
【注意】:1)为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。2)若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2. 染色
2.1 对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。【注意】:对Lysotracker Green DND-26内化过程的动力学研究表明,活细胞摄取此染料仅需数秒即可。缺点在于此探针可能引起溶酶体产生“碱性效应Alkalizing effect”,也就是说过长孵育时间会诱导溶酶体pH值提高。建议仅当该探针于37℃孵育细胞1-5min才可用作pH指示剂。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针yb-1108 NAMALWA(Burkitt's 淋巴瘤细胞)
yb-1109 T24(膀胱移行细胞癌细胞)
yb-1110 HuT78(T淋巴细胞白血病细胞)
yb-1111 SW-13(肾上腺皮质腺癌细胞 )
yb-1112 SW-13(肾上腺皮质腺癌细胞 )
yb-1113 Dami(巨核细胞白血病细胞)
yb-1114 OS-RC-2(肾癌细胞)
yb-1115 MEG-01
yb-1116 786-O [786-0](肾透明细胞腺癌细胞)
yb-1117 786-O [786-0](肾透明细胞腺癌细胞)
yb-1118 K-562(慢性髓原白血病细胞)
yb-1119 K-562(慢性髓原白血病细胞)
yb-1120 Hce-8693(盲肠腺癌细胞(未分化))
yb-1121 HEL299(红白细胞白血病细胞)
yb-1122 CW-2(结肠腺癌细胞)
yb-1123 A-375 [A375](恶性黑色素瘤细胞)
yb-1124 COLO-320(结肠腺癌细胞)
yb-1125 A172(胶质母细胞瘤细胞)
yb-1126 SW480 [SW-480](结肠癌细胞)
yb-1127 SHG-44(胶质瘤细胞)
yb-1128 Caco-2(结肠腺癌细胞)
yb-1129 Caco-2(结肠腺癌细胞)
yb-1130 U251(胶质瘤细胞)
yb-1131 LS 174T(结肠腺癌细胞)
yb-1132 SK-N-MC(神经上皮瘤细胞)
yb-1133 SK-N-MC(神经上皮瘤细胞)
yb-1134 BxPC-3(原位胰腺腺癌细胞)
yb-1135 BxPC-3(原位胰腺腺癌细胞)
yb-1136 KP-N-NS(肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移))
yb-1137 AsPC-1(转移胰腺腺癌细胞)
yb-1138 AsPC-1(转移胰腺腺癌细胞)
yb-1139 U-2 OS(骨肉瘤细胞)
yb-1140 U-2 OS(骨肉瘤细胞)
yb-1141 GBC-SD(胆囊癌细胞)
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文献和实验细胞 , 稳定不漏出: Mitoracker Orange CMTMRos 551/576, (氧化型)Mitoracker Orange 还原型, 只能染活细胞 (2)溶酶体 Lysosome中性红 541/640: 微偏碱性, 可标记溶酶体等酸性器官为非特异性 AO : LysoTracker Green DND-26 504/511, 染活细胞 LysoTracker Blue LysoTracker Red (3)内质网 Endoplasmic
主要分为两大类,第一类是 PKH67(绿色荧光)/PKH26(红色荧光),由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合,所以染色效果较好,应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料,包括DiI(橙色荧
BlueDND-192, DND-167 374 425 LysoSensor GreenDND-153, DND-189 442 505 LysoSensor Yellow/Blue 384(low pH)329(high pH) 540(low pH)440(high pH) LysoTracker Green 504 511 LysoTracker Yellow 534 551 LysoTracker Red 577 592 Magdala Red 524 600 Magnesium
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