ES Cell 3D Culture Kit

产品简介：对于ES Cell 3D Culture Kit培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的ES Cell 3D Culture Kit，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的ES Cell 3D Culture Kit。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的ES Cell 3D Culture Kit培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液ES Cell 3D Culture Kit放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养ES Cell 3D Culture Kit，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在ES Cell 3D Culture Kit培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
ES Cell 3D Culture Kit同类产品推荐：xyA139Mu 小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)ELISA试剂盒 检测范围
xyA919Mu 小鼠二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)ELISA试剂盒 检测范围
xyB539Mu 小鼠血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒 检测范围
xyB265Mu 小鼠胰多肽(PP)ELISA试剂盒 检测范围
xyB311Mu 小鼠阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒 检测范围
xyB686Mu 小鼠B-细胞激活因子(BAFF)ELISA试剂盒 检测范围
xyA442Mu 小鼠阻抑素(PHB)ELISA试剂盒 检测范围
xyB685Mu 小鼠整合素αM(ITGαM)ELISA试剂盒 检测范围
xyB966Mu 小鼠多配体蛋白聚糖1(SDC1)ELISA试剂盒 检测范围
xyA977Mu 小鼠盘状结构域受体家族成员1(DDR1)ELISA试剂盒 检测范围
xyB317Mu 小鼠穿孔素1(PRF1)ELISA试剂盒 检测范围
xyB017Mu 小鼠α2-巨球蛋白(α2M)ELISA试剂盒 检测范围
xyB063Mu 小鼠泛素结合酶E2A(UBE2A)ELISA试剂盒 检测范围
xyG208Mu 小鼠叉头框蛋白A2(FOXA2)ELISA试剂盒 检测范围
xyA344Mu 小鼠回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)ELISA试剂盒 检测范围
xyC242Mu 小鼠核仁素(NCL)ELISA试剂盒 检测范围
xyC363Mu 小鼠染色框同源物3(CBX3)ELISA试剂盒 检测范围
xyC664Mu 小鼠核仁磷酸蛋白(NPM)ELISA试剂盒 检测范围
xyC684Mu 小鼠2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA试剂盒 检测范围
xyA692Mu 小鼠神经纤维网蛋白1(NRP1)ELISA试剂盒 检测范围
xyB254Mu 小鼠血管抑素(ANG)ELISA试剂盒 检测范围
xyE624Mu 小鼠周期素依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA试剂盒 检测范围
xyA636Mu 小鼠成纤维细胞生长因子7(FGF7)ELISA试剂盒 检测范围
xyB404Mu 小鼠Thy1细胞表面抗原(Thy1)ELISA试剂盒 检测范围
xyA985Mu 小鼠P-选择素糖蛋白配体1(PSGL1)ELISA试剂盒 检测范围
xyJ130Mu 小鼠V-Ets骨髓成红细胞增多症病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA试剂盒 检测范围
xyF878Mu 小鼠分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)ELISA试剂盒 检测范围
xyA717Mu 小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)ELISA试剂盒 检测范围
xyG435Mu 小鼠桥粒芯胶粘蛋白1(DSC1)ELISA试剂盒 检测范围
xyD424Mu 小鼠肌球蛋白ⅤA(MYO5A)ELISA试剂盒 检测范围
xyE346Mu 小鼠兴奋性氨基酸转运蛋白2(EAAT2)ELISA试剂盒 检测范围
xyG368Mu 小鼠钠/钾离子转运ATP酶α2肽(ATP1α2)ELISA试剂盒 检测范围
xyG371Mu 小鼠钠/钾离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1)ELISA试剂盒 检测范围
xyG377Mu 小鼠钙离子转运ATP酶B2(ATP2B2)ELISA试剂盒 检测范围
xyG916Mu 小鼠泛醌细胞色素C还原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)ELISA试剂盒 检测范围
xyJ599Mu 小鼠肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)ELISA试剂盒 检测范围
xyC585Mu 小鼠尿皮质素2(UCN2)ELISA试剂盒 检测范围
xyD140Mu 小鼠尿皮质素3(UCN3)ELISA试剂盒 检测范围
xyE562Mu 小鼠TATA框结合蛋白关联因子12(TAF12)ELISA试剂盒 检测范围
xyF104Mu 小鼠精氨酸/丝氨酸丰富剪接因子4(SRSF4))ELISA试剂盒 检测范围
xyE020Mu 小鼠蛋白磷酸酶3调节因子亚基1(PPP3R1)ELISA试剂盒 检测范围
xyE806Mu 小鼠N-甲基-D-天氡氨酸离子能谷氨酸受体2A(GRIN2A)ELISA试剂盒 检测范围
以上方法主要是针对贴壁生长的ES Cell 3D Culture Kit，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止ES Cell 3D Culture Kit脱落。