Stemgent® Reprogramming Ecotro

产品简介：对于Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM同类产品推荐：xy-E12938 大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12939 大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12940 大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12941 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12942 大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12943 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12944 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12945 大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12946 大鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12947 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12948 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12949 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12950 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12951 裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12952 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12953 裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12954 裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12955 仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12956 仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12957 仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12958 仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12959 豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12960 豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12961 豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12962 豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12963 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12964 豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12965 豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12966 豚鼠一氧化氮(NO)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12967 豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12968 豚鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12969 豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12970 豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12971 豚鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12972 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12973 豚鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12974 豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12975 豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12976 豚鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12977 豚鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12978 豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12979 豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12980 豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 检测范围
xy-E12981 豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒 检测范围
以上方法主要是针对贴壁生长的Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止Stemgent® Reprogramming Ecotropic Retrovirus Kit: Mouse OSKM脱落。