CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针

CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针产品描述

CFDA, SE，英文全称Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料，不仅可用于细胞增殖的体外实验，还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。

CFDA, SE是二乙酸荧光素（Fluorescein diacetate，FDA）的衍生物，具细胞膜渗透性，本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后，可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可发强烈的绿色荧光，不能穿透细胞膜，能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上，同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内，被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数月，因此非常适用于细胞群落分析。

CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一，优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪（FL1通道）根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次（1/2的荧光强度），二次（1/4的荧光强度），三次（1/8的荧光强度），以及更多分裂次数的细胞。CFSA，SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可用于成纤维细胞，自然杀伤细胞，造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。

CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式细胞仪检测细胞增殖外，还可用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。本品以粉末形式提供，需用DMSO制备储存液后再使用。


CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针
产品性质

中文名称

5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯

英文名称

5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester； CFDA, SE

CAS#

150347-59-4

分子式

C29H19NO11

分子量

557.46

纯度

≥95%（HPLC）

Ex(nm)

494

Em(nm)

521

结构式

cfda,se.tif

运输与保存

室温运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。避免反复冻融。

注意事项

1） 不同的细胞其细胞内酯酶活性不同，因此染色效果具有差异性。

2） 荧光染料均存在淬灭问题，染色过程需尽量避光。

3） 为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针操作方法

1. CFSE储存液（5mM）的配制

用1ml DMSO溶解2.79mg CFSE，充分混匀即得到5mM的储存液（1mg/ml的CFSE溶液浓度相当于其摩尔浓度1.8mM）。

【注意】该储存液需立即使用，根据使用量计算如有剩余请务必分装后于≤-20℃避光干燥保存，避免反复冻融。

2. CFSE工作液（0.5-5µM）的配制

使用前用含20mM Hepes的Hanks 缓冲液（HHBS）或其他不含氨基的合适缓冲液（pH=7.0）对上述CFSE 储存液进行1,000~10,000倍稀释，并旋涡震荡混匀。

3. 操作方法

【注意】：以下是针对活细胞染色的推荐步骤，可根据实际情况进行适当调整。

1） 根据实验要求，用适当药物处理细胞；

2） 离心收集细胞，调整细胞浓度为1-5×105个/管；

3） 用500µl CFSE工作液悬浮细胞，于室温或37℃避光孵育10-30min；

4） 吸除CFSE 染液，用HHBS或其他合适缓冲液清洗细胞，用500µl预热HHBS或培养液悬浮细胞；

5） 在Ex/Em=490/520nm下用流式细胞仪（FL1通道）或荧光显微镜观察细胞。

CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针yb1534 EpiCGS 上皮细胞生长因子 Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml
yb1535 EpiCGS-2 上皮细胞生长因子-2 Epithelial Cell Growth Supplement-2 5 ml
yb1536 EpiCGS-a 动物上皮细胞生长因子-2 Epithelial Cell Growth Supplement-animal 5 ml
yb1537 MCGS 肾系膜细胞生长因子 Mesangial Cell Growth Supplement 5 ml
yb1538 UCGS 尿道上皮细胞生长因子 Urothelial Cell Growth Supplement 5 ml
yb1539 PEpiCGS 前列腺上皮细胞生长因子 Prostate Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml
yb1540 ObGS 成骨细胞生长因子 Osteoblast Growth Supplement 5 ml
yb1541 CGS 软骨细胞生长因子 Chondrocyte Growth Supplement 5 ml
yb1542 SGS 滑膜细胞生长因子 Synoviocyte Growth Supplement 5 ml
yb1543 NPCGS 髓核细胞生长因子 Nucleus Pulposus Cell Growth Supplement 5 ml
yb1544 HGS 肝细胞生长因子 Hepatocyte Growth Supplement 5 ml
yb1545 SteCGS 星形细胞生长因子 Stellate Cell Growth Supplement 5 ml
yb1546 StemGS 人胚胎干细胞生长因子 50X StemGS. Human Embryonic Stem Cell Growth Supplement 50X 10 ml
yb1547 StemGS-XF 无异种多功能干细胞生长因子 50X Xenofree Human Pluripotent Stem Cell Growth Supplement 50X 10 ml
yb1548 CMGS 心肌细胞生长因子 Cardiac Myocyte Growth Supplement 5 ml
yb1549 CEpiCGS 角膜上皮细胞生长因子 Corneal Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml
yb1550 TGS 滋养层细胞生长因子 Trophoblast Growth Supplement 5 ml
yb1551 PAdDS 前脂肪细胞分化生长因子 Preadipocyte Differentiation Supplement
yb1552 PAGS 前脂肪细胞生长因子 Preadipocyte Growth Supplement 5 ml
yb1553 AdGS 脂肪细胞生长因子 Adipocyte Growth Supplement 5 ml
yb1554 OEpiCGS 卵巢上皮细胞生长因子 Ovarian Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml
yb1555 MODS 间充质干细胞成骨分化生长因子 Mesenchymal Stem Cell Osteogenic Differentiation supplement 5 ml
yb1556 MADS 间充质干细胞脂肪分化生长因子 Mesenchymal Stem Cell Adipogenic Differentiation supplement 5 ml
yb1557 MSCGS 间充质干细胞生长因子 Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement 5 ml
yb1558 MSCGS-sf 间充质干细胞生长因子 Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement-serum free 5 ml
yb1559 MSCGS-acf 间充质干细胞生长因子-无动物组分 Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement-animal component free 5 ml
yb1560 MCDS 间充质干细胞软骨分化生长因子 Mesenchymal Stem Cell Chondrogenic Differentiation Supplement 5 ml
yb1561 MEpiCGS 乳腺上皮细胞生长因子 Mammary Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml
yb1562
yb1563 Cell Culture Reagents
yb1564 FBS 胎牛血清 Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 10 ml
yb1565 FBS 胎牛血清 Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 25 ml
yb1566 T/E 胰酶/EDTA消化液 Trypsin/EDTA solution 100 ml
yb1567 TNS 胰酶中和液 Trypsin Neutralization Solution 100 ml
yb1568 TNS-sf 胰酶中和液-无血清 TNS-sf (Trypsin Neutralization Solution-serum free) 100 ml
yb1569 ECDS 非酶细胞裂解液 Enzyme-Free Cell Dissociation Solution 100 ml
yb1570 CFM 细胞冻存液 Cell Freezing Medium 50 ml
yb1571 SF-CFM 无血清细胞冻存液 Serum-Free Cell Freezing Medium 50 ml
yb1572 StemCryo 人胚胎干细胞冻存液 Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium 50ml
yb1573 StemCryo 人胚胎干细胞冻存液 Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium, 5 x 10mL
yb1574 TB 台盼蓝 Trypan Blue, 0.4% 50 ml
yb1575 DPBS 磷酸盐缓冲液 Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline 500 ml
yb1576 HBSS 平衡盐溶液 Hank's Balanced Salt Solution 500 ml
yb1577 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 1 mg/ml 1 ml
yb1578 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 10 mg/ml 1 ml
yb1579 GSN 0.2％的明胶溶液 0.2% Gelatin Solution 100ml
yb1580 FBS 胎牛血清 Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 500 ml
yb1581 P/S 青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution 5 ml
yb1582 P/S 青霉素/链霉素溶液 Penicillin/Streptomycin Solution 100 ml