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上皮样
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干冰运输
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贴壁生长
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针产品描述
DiI、DiO、DiD和DiR是一系列亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构，这是一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。这类染料具有很高的摩尔消光系数，极性依赖性的荧光和很短的激发寿命。
DiD是DiI的衍生物，具有明显往红光迁移的激发和发射光谱，这一特性使其特别适合标记具显著自荧光效应的细胞或组织。DiD可被633nm的氦-氖（He-Ne）激光所激发，呈红色荧光，在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，进入细胞后，染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞染色。
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针产品性质
英文别名（English Synonym）
DiIC18(5); 1,1-Dioctadecyl-3,3,3,3-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate
分子式（Formula）
C61H99ClN2O4
分子量（Molecular Weight）
959.91
Ex/Em(nm)
644/663
推荐滤光器
XF47-Omega, 31023-Chroma
外观（Appearance）
红色或紫色或深蓝色固体
纯度（Purity）
＞97%（TLC）
溶解性（Solubility）
溶于DMF，DMSO，甲醇
结构式（Structure）
运输和保存方法
冰袋（wet ice）运输。产品-20 ºC干燥避光保存，有效期二年。
注意事项
1） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2） 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针使用方法
1. 染色液制备
（1）配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。
【注】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。
（2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5 μM的工作液。
【注】工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始最优浓度的摸索。
2. 悬浮细胞染色
（1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
（2）37 ℃孵育细胞 2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。
（4）倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
（5）重复（3），（4）步骤两次以上。
3. 贴壁细胞的染色
（1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）37 ℃孵育细胞 2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
（2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005
5. 流式细胞仪检测
经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞可分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针yb1072 ATCC
yb1073 胃肠细胞系统 ATCC
yb1074 HEEpiC 人食道微血管内皮细胞 Human Esophageal Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1075 HESMC 人食道平滑肌细胞 Human Esophageal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1076 HEEpiC 人食管上皮细胞 Human Esophageal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1077 HEF 人食管成纤维细胞 Human Esophageal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1078 HGSMC 人胃平滑肌细胞 Human Gastric Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1079 HGEpiC 人胃上皮细胞 Human Gastric Epithelial Cells ATCC
yb1080 HIMEC 人肠微血管内皮细胞 Human Intestinal Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1081 HISMC 人肠平滑肌细胞 Human Intestinal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1082 HIF 人肠道成纤维细胞 Human Intestinal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1083 HCoMEC 人结肠微血管内皮细胞 Human Colonic Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1084 HCSMC 人结肠平滑肌细胞 Human Colonic Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1085 HCoEpiC 人结肠上皮细胞 Human Colonic Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1086 HRSMC 人直肠平滑肌细胞 Human Rectal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1087 ATCC
yb1088 肺细胞系统 ATCC
yb1089 HPMEC 人肺微血管内皮细胞 Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1090 HPMEC-a 人肺微血管内皮细胞-成人 Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1091 HPAEC 人肺动脉内皮细胞 Human Pulmonary Artery Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1092 HPASMC 人肺动脉平滑肌细胞 Human Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1093 HPAF 人肺动脉外膜成纤维细胞 "Human Pulmonary Artery Adventitia Fibroblasts
" 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1094 HPAEpiC 人肺泡上皮细胞 Human Pulmonary Alveolar Epithelial Cells 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1095 HBEpiC 人支气管上皮细胞 Human Bronchial Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1096 HTEpiC 人气管上皮细胞 Human Tracheal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1097 HSAEpiC 人小气道上皮细胞 Human Small Airway Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1098 HPF 人肺成纤维细胞 Human Pulmonary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1099 HPF Human Pulmonary Fibroblasts 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1100 HPF-a 人肺成纤维细胞-成人 Human Pulmonary Fibroblasts-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1101 HBSMC 人支气管平滑肌细胞 Human Bronchial Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1102 HTSMC 人气管平滑肌细胞 Human Tracheal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1103 HBF 人支气管成纤维细胞 Human Bronchial Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1104 ATCC
yb1105 骨骼肌细胞系统 ATCC
yb1106 HSkMC 人骨骼肌细胞 Human Skeletal Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1107 HSkMSC 人骨骼肌卫星细胞 Human Skeletal Muscle Satellite Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1108 HSkMM 人骨骼肌成肌细胞 Human Skeletal Muscle Myoblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1109 ATCC
yb1110 内分泌细胞系统 ATCC
yb1111 HAdMEC 人肾上腺微血管内皮细胞 Human Adrenal Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1112 HAdCC 人肾上腺皮质细胞 Human Adrenal Cortical Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1113 HAdF 人肾上腺成纤维细胞 Human Adrenal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1114 HPaSteC 人胰腺星状细胞 Human Pancreatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
DiI、DiO、DiD和DiR是一系列亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构，这是一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。这类染料具有很高的摩尔消光系数，极性依赖性的荧光和很短的激发寿命。
DiD是DiI的衍生物，具有明显往红光迁移的激发和发射光谱，这一特性使其特别适合标记具显著自荧光效应的细胞或组织。DiD可被633nm的氦-氖（He-Ne）激光所激发，呈红色荧光，在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，进入细胞后，染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞染色。
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针产品性质
英文别名（English Synonym）
DiIC18(5); 1,1-Dioctadecyl-3,3,3,3-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate
分子式（Formula）
C61H99ClN2O4
分子量（Molecular Weight）
959.91
Ex/Em(nm)
644/663
推荐滤光器
XF47-Omega, 31023-Chroma
外观（Appearance）
红色或紫色或深蓝色固体
纯度（Purity）
＞97%（TLC）
溶解性（Solubility）
溶于DMF，DMSO，甲醇
结构式（Structure）
运输和保存方法
冰袋（wet ice）运输。产品-20 ºC干燥避光保存，有效期二年。
注意事项
1） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2） 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针使用方法
1. 染色液制备
（1）配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。
【注】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。
（2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5 μM的工作液。
【注】工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始最优浓度的摸索。
2. 悬浮细胞染色
（1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
（2）37 ℃孵育细胞 2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。
（4）倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
（5）重复（3），（4）步骤两次以上。
3. 贴壁细胞的染色
（1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）37 ℃孵育细胞 2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
（2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005
5. 流式细胞仪检测
经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞可分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针yb1072 ATCC
yb1073 胃肠细胞系统 ATCC
yb1074 HEEpiC 人食道微血管内皮细胞 Human Esophageal Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1075 HESMC 人食道平滑肌细胞 Human Esophageal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1076 HEEpiC 人食管上皮细胞 Human Esophageal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1077 HEF 人食管成纤维细胞 Human Esophageal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1078 HGSMC 人胃平滑肌细胞 Human Gastric Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1079 HGEpiC 人胃上皮细胞 Human Gastric Epithelial Cells ATCC
yb1080 HIMEC 人肠微血管内皮细胞 Human Intestinal Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1081 HISMC 人肠平滑肌细胞 Human Intestinal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1082 HIF 人肠道成纤维细胞 Human Intestinal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1083 HCoMEC 人结肠微血管内皮细胞 Human Colonic Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1084 HCSMC 人结肠平滑肌细胞 Human Colonic Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1085 HCoEpiC 人结肠上皮细胞 Human Colonic Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1086 HRSMC 人直肠平滑肌细胞 Human Rectal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1087 ATCC
yb1088 肺细胞系统 ATCC
yb1089 HPMEC 人肺微血管内皮细胞 Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1090 HPMEC-a 人肺微血管内皮细胞-成人 Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1091 HPAEC 人肺动脉内皮细胞 Human Pulmonary Artery Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1092 HPASMC 人肺动脉平滑肌细胞 Human Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1093 HPAF 人肺动脉外膜成纤维细胞 "Human Pulmonary Artery Adventitia Fibroblasts
" 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1094 HPAEpiC 人肺泡上皮细胞 Human Pulmonary Alveolar Epithelial Cells 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1095 HBEpiC 人支气管上皮细胞 Human Bronchial Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1096 HTEpiC 人气管上皮细胞 Human Tracheal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1097 HSAEpiC 人小气道上皮细胞 Human Small Airway Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1098 HPF 人肺成纤维细胞 Human Pulmonary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1099 HPF Human Pulmonary Fibroblasts 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1100 HPF-a 人肺成纤维细胞-成人 Human Pulmonary Fibroblasts-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1101 HBSMC 人支气管平滑肌细胞 Human Bronchial Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1102 HTSMC 人气管平滑肌细胞 Human Tracheal Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1103 HBF 人支气管成纤维细胞 Human Bronchial Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1104 ATCC
yb1105 骨骼肌细胞系统 ATCC
yb1106 HSkMC 人骨骼肌细胞 Human Skeletal Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1107 HSkMSC 人骨骼肌卫星细胞 Human Skeletal Muscle Satellite Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1108 HSkMM 人骨骼肌成肌细胞 Human Skeletal Muscle Myoblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1109 ATCC
yb1110 内分泌细胞系统 ATCC
yb1111 HAdMEC 人肾上腺微血管内皮细胞 Human Adrenal Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1112 HAdCC 人肾上腺皮质细胞 Human Adrenal Cortical Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1113 HAdF 人肾上腺成纤维细胞 Human Adrenal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1114 HPaSteC 人胰腺星状细胞 Human Pancreatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
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文献和实验相关实验
大学的细菌遗传学家，文章的通讯作者Christian Lesterlin等人是想要开发一个实时显微镜系统，希望能详细观察质粒转移（细菌细胞彼此共享DNA的过程），他们利用精心设计的荧光蛋白，跟踪质粒，将DNA从供体细胞穿梭到受体微生物，以及一旦它们在新宿主体内翻译后产生的蛋白质。研究人员利用大肠杆菌常见共享抗生素抗性基因作为案例研究，仔细观察细菌如何通过DNA编码TetA蛋白，这是一种通过将四环素分流出去，使细胞对四环素产生抗性的泵。不久之后，他们发现质粒DNA到达非抗性细胞一段时间后，受体细胞膜
。 DiI(细胞膜红色荧光探针) DiI即DiIC18(3)，全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。 DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光，DiI
光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光）。其中DiR的红外荧光可穿透细胞和组织，在活体成像中用来示踪。 图3 DiI 标记的外泌体通过静脉注射观察在体内器官的分布情况 J Cereb Blood Flow Metab. 2018 May;38(5):767-779. 图4 DiO 标记的外泌体与 HCT116 细胞共孵育 BMC Cancer. 2018 Jan 6;18(1):47. 图5 DiR 标记的外泌体静脉注射小鼠结肠癌肿瘤模型 J
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