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- 文献和实验
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1000
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上海钰博
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- 物种来源:
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- 免疫类型:
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- 细胞形态:
上皮样
- 是否是肿瘤细胞:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
干冰运输
- 生长状态:
贴壁生长
CM-Dil为DiI的一种衍生物,通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞,适合监测细胞运动以及细胞定位分析。因具有良好的染料维持性,可用以追踪多次传代细胞的运动特性。其有着强而稳定的红色荧光(Ex/Em=553/570nm),与绿色荧光染料以及蛋白具有良好的荧光分辨性,适合做多重指标染色。CM-Dil可自由穿透质膜进入细胞,从而产生不具有膜渗透性的反应产物。经过几次传代此染料还可完好的维持在活细胞内,染料随着细胞分裂传入子代细胞内,但不会进入相邻细胞。至少在72小时内保持荧光信号(一般可传3~6代)。工作浓度下,此染料无细胞毒性,不会影响细胞活力以及增殖能力。
与Dil相比,CM-Dil水溶性更好一些,便于悬浮细胞和固定细胞染色溶液的制备;CM-Dil携带的CM基团(即氯甲基替代基团)能与多肽及蛋白上的巯基反应从而使该分子在醛类物质中保持稳定。与其他膜染料如DiI和PKH26不同,一些细胞经CM-Dil染色后,可在后续的固定,透化和石蜡包埋处理中维持稳定的标记,因此特别适用于同时做细胞膜标记以及后续的免疫组化,荧光原位杂交或者电镜观察的实验。
研究证实,CM-DiI标记后荧光在胞内表达稳定,阳性标记率达98%以上,标记细胞形态良好,能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况;或将标记的细胞注入体内,可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
CM-DiI 活细胞染色剂产品性质
同义名(Synonym)
3H-Indolium,5-[[[4-(chloromethyl)benzoyl]amino]methyl]-2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-, chloride/
CAS号(CAS NO.)
180854-97-1
分子式(Molecular Formula)
C68H105Cl2N3O
分子量(Molecular Weight)
1051.5
外观(Appearance)
红色固体
Ex/Em
553nm/570nm
推荐滤光器(Optical Filters)
XF23-Omega, 31002-Chroma
结构式(Structure)
运输与保存方法
室温运输。
产品-20 ºC干燥避光保存,有效期一年。
CM-DiI 活细胞染色剂注意事项
1) 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 染色液制备
1)配置DMF,DMSO或EtOH 储存液:储存液用DMF、DMSO或EtOH配制浓度1-2mg/ml。
注:未使用的储存液保存在-20℃,分装保存,避免反复冻融。
2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或D-PBS)稀释储存液,配制浓度为1~2 μM的工作液。
注:最佳的工作液浓度请根据不同细胞和自身的实验体系来调整。
2. 细胞标记(悬浮细胞)
1) 在标记前根据实验要求按照上述方法配制好工作液;
2) 建议待标记细胞在染色工作液中于37℃孵育≤5min,再于4℃孵育15min(低温孵育可降低细胞对染料的内吞作用,有助于染料对质膜的标记,并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性)。
3) 标记完成后,用PBS清洗细胞,并用新鲜培养基重悬细胞。
注:对于贴壁细胞,可直接就贴壁状态的细胞进行荧光标记,相较于消化处理后的细胞具有更高的活力。
2. 染色后处理
1)CM-DiI染色后的细胞直接用3.7% 甲醛(溶于PBS),于37℃固定10min;
2)室温条件PBS清洗2次,每次5min;
3)于-20℃中,用丙酮透化处理10min;
4)室温条件PBS清洗2次,每次5min;并根据自身的实验要求以及细胞类型,进行后续的实验如石蜡包埋-免疫组化分析,电镜分析等。有报道提到,经CM-DiI染色后的大鼠嗜铬细胞瘤细胞可兼容2%(w/v)多聚甲醛和0.2%(w/v) Triton X-100的透化作用;从绵阳淋巴细胞内再次纯化的CM-DiI标记细胞,经甲醛固定,石蜡包埋,切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇,以及脱水后仍能维持荧光;
CM-DiI 活细胞染色剂yb-axbz-092 小鼠皮肤细胞 JB6-C41 规格25毫升/株.
yb-axbz-093 小鼠前成骨细胞 MC-3T3 规格25毫升/株.
yb-axbz-094 小鼠成骨细胞系 MC3T3-E1 规格25毫升/株.
yb-axbz-095 鼠胚成骨细胞 3T3-E1 规格25毫升/株.
yb-axbz-096 大鼠肾小管上皮细胞,ATCC:CRL-6509 NRK 规格25毫升/株.
yb-axbz-097 大鼠肾细胞 NRK-52E 规格25毫升/株.
yb-axbz-098 小鼠饲养层上皮细胞 HPT-8 规格25毫升/株.
yb-axbz-099 LLC:Leuwis肺癌细胞 规格25毫升/株.
yb-axbz-100 化学转化小鼠鼻咽上皮细胞 TMNE 规格25毫升/株.
yb-axbz-101 大鼠鼻咽癌细胞 FAT 规格25毫升/株.
yb-axbz-102 小鼠大肠癌细胞 CT-26.WT 规格25毫升/株.
yb-axbz-103 小鼠结肠癌细胞 CMT93 规格25毫升/株.
yb-axbz-104 大鼠埀体瘤细胞 GH3 规格25毫升/株.
yb-axbz-105 产EBV的绒猴白细胞 B95-8 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-axbz-106 小鼠艾氏腹水瘤细胞TCM15 S180 规格25毫升/株.
yb-axbz-107 小鼠胚胎成纤维细胞 T6-Swiss albino 规格25毫升/株.
yb-axbz-108 小鼠皮下结缔组织细胞 A9 规格25毫升/株.
yb-axbz-109 蚊子细胞 C6/36 规格25毫升/株.
yb-axbz-110 鼠小脑细胞 C8-D1A 规格25毫升/株.
yb-axbz-111 猫肾细胞 CRFK 规格25毫升/株.
yb-axbz-112 猫肾细胞 F81 规格25毫升/株.
yb-axbz-113 中国仓鼠卵巢细胞 CTLA4 Ig-24 规格25毫升/株.
yb-axbz-114 非洲绿猴非洲绿猴肾细胞 CV-1 规格25毫升/株.
yb-axbz-115 牛胚气管细胞 EBTr (NBL-4) 规格25毫升/株.
yb-axbz-116 恒河猴胚肾细胞 FRhK-4 规格25毫升/株.
yb-axbz-117 大鼠肝癌细胞 H4-ⅡE 规格25毫升/株.
yb-axbz-118 大鼠肝细胞瘤 H4-II-E-C3 规格25毫升/株.
yb-axbz-119 大鼠心肌细胞 H9c2(2-1) 规格25毫升/株.
yb-axbz-120 大鼠肾小球系膜细胞EC (HBZY-1) HBZY-1 规格25毫升/株.
yb-axbz-121 绿猴恒河猴肾细胞 LLC-MK2 规格25毫升/株.
yb-axbz-122 牛肾细胞 MDBK (NBL-1) 规格25毫升/株.
yb-axbz-123 貂肺上皮细胞 Mv.1.Lu(NBL-7) 规格25毫升/株.
yb-axbz-124 小鼠脑神经瘤细胞 Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 规格25毫升/株.
yb-axbz-125 大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383 规格25毫升/株.
yb-axbz-126 负鼠肾细胞 OK 规格25毫升/株.
yb-axbz-127 小鼠骨髓瘤细胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 规格25毫升/株.
yb-axbz-128 小鼠骨髓瘤细胞 P3X63Ag8.653 规格25毫升/株.
yb-axbz-129 猪髋动脉内皮细胞 PIEC 规格25毫升/株.
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文献和实验1.选用适合您成像需求的显微镜 并非所有显微镜都同样适合活细胞成像。例如,倒置显微镜从样品下方成像,非常适合活细胞成像。这样可使物镜更靠近活体标本,而这对于大多数高数值孔径(NA)物镜来说是必需的要求。 2.使用盖玻片底培养皿 部分塑料底培养皿会增加自发荧光并降低信噪比(S/N)。在对背景要求较高的实验中,可优先选择成像级低自发荧光材料或盖玻片底培养皿。 3.使用透射率较高的荧光滤光片提高信噪比 荧光滤光片镜组及其内部的滤光片是活细胞荧光成像实验重要的硬件之一。 选用具有高透射率的滤光
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实现活细胞成像自动化以及简化任务对于达到实验目标至关重要。这里介绍 4 个需要留意的技巧: 1. 让标本在温暖、稳定的环境中保持健康状态 活细胞成像过程中最大挑战之一就是如何在温暖舒适的培养箱之外确保样品健康并能够在显微镜下表现正常。 可以利用能够为细胞提供稳定温度、湿度和 CO 2 密度的显微镜专用载物台上式培养箱或封闭式培养箱确保您的标本环境尽可能适宜。 另外可以加热物镜,否则其作为寒冷的接触源可能会损害样品的健康。 注意,微孔板外围区域可能存在比中心区域更高的环境波动风险
技术资料暂无技术资料 索取技术资料






