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- 2025年10月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海古朵生物有限公司
- 检测范围：
科研
- 检测方法：
酶联检测
- 适应物种：
小鼠
- 规格：
48T/96T
端粒酶ELISA
货号：GD-NB2776
规格:48T/96T
运输条件:2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
端粒酶ELISA操作步骤：
1）取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。
2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。
3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。
7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。
10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。
12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
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文献和实验20 世纪 80 年代中期，科学家们发现了端粒酶（Telomerase）。端粒酶是一种特殊的逆转录酶，由 RNA 和蛋白质组成，是以自身 RNA 为模板，合成端粒重复序列，加到新合成的 DNA 链末端，负责端粒的延长。端粒酶可以把 DNA 复制损失的端粒填补起来，藉由把端粒修复延长，可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗，使细胞分裂的次数增加。 2009 年，诺贝尔医学奖获得者发现端粒和端粒酶可以保护染色体，让研究人员能够更清楚地了解癌症和老化的过程，解决了生物学上的一个重大
，准确、重复性好。快速，6-8小时得到结果。现介绍如下：1.原理：本法是建立在Kim等人描述的TRAP方法的基础上的，它将端粒酶介导的衍生产物进行PCR扩增,并与后序的ELISA法结合在一起。本法可分如下几步：（1）延伸/扩增：第一步：端粒酶将端粒重复序列（TTAGGG）加到带有生物素标记的P1-TA引物的3’末端。第二步：利用引物P1-TS和T2通过PCR扩增这些延伸出的产物，产生出的PCR产物带有特异的端粒酶-6-核苷酸的延伸产物。（2）ELISA测定：PCR产物变性后与Dig标记的端粒特异
如何延长端粒、减缓衰老？Nature 子刊揭示端粒延长的全新机制，效果超越端粒酶
。由 B 细胞、树突细胞或巨噬细胞组成的抗原呈递细胞充当 T 淋巴细胞（端粒受体细胞）的「端粒供体」，T 细胞端粒延长 3 kb。在端粒转移后，受体 T 细胞变得更长寿，并具有长期免疫记忆和干细胞属性，使 T 细胞能够长期保护宿主免受致命感染。 题图来源：Nature Cell Biology 端粒重组机制 一些 T 细胞从抗原呈递细胞获取端粒囊泡来延长端粒的行为是独立于端粒酶作用的。在与这些 T 细胞接触后，抗原呈递细胞降解端粒蛋白复合物（Shelterin）以提供端粒，这些端粒被端粒修剪因子
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