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- 详细信息
- 文献和实验
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-20℃
- 英文名:
Phenyl beta-D-thioglucopyranoside;
- 供应商:
群晓科苑
- CAS号:
2936-70-1
别称:Phenyl beta-D-thioglucopyranoside;
品牌:英国glycosynth
货号:79059
规格:1g
CAS号:2936-70-1
分子式:C12H16O5S

分子量:272.3
纯度:≥98%
Glycosynth公司简介

Glycosynth专门生产高质量显色酶(发色,chromogenic)和荧光酶(fluorogenic)底物,用于检测糖苷酶(glycosidase),磷酸酶(phosphatase),酯酶(esterase)和氨基肽酶(aminopeptidase)等多种酶的活性。产品执行ISO 9001:2008标准。
订购联系方式:010-84504282
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文献和实验细胞后,还需要对转化菌落进行筛选鉴定,通过α互补进行筛选是最常用的鉴定方法之一。 目前实验使用的许多载体都具有一段大肠杆菌β-半乳糖苷酶的启动子及其编码α肽链的DNA序列,此结构称为lacZ基因。lacZ 基因编码的α肽链与失去正常氨基末端的β半乳糖苷酶突变体互补,产生具有功能活性的β半乳糖苷酶分子,这种现象称为α互补。在IPTG(异丙基硫代β-D-半乳糖苷)的诱导下,β半乳糖苷酶能将X-Gal
型Lac-E.Coli可表达该酶的ω肽。单独存在的α及ω肽均无β-半乳糖苷酶活性,只有宿主细胞与克隆载体同时共表达这两个肽时,宿主细胞内才有β-半乳糖苷酶活性,在含有底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚- β-D-半乳糖苷)的诱导剂IPTG(异丙基硫代- β-D-半乳糖苷)条件下,菌落呈蓝色,这就是α-互补。如果LacZ基因由于插入外源基因而失活,结果无α肽表达,转化菌落无α-互补,缺乏
底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到pBS质粒的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在同样条件下含重组质粒的转化子在生色诱导培养基上只能形成白色菌落。在麦康凯培养基上,α-互补产生的Lac+细菌由于含β-半乳糖苷酶,能分解麦康凯培养基中的乳糖,产生乳酸,使pH下降,因而产生红色
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