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英文名称:
规格:2ml X 10支
1%TTC溶液产品说明与用途:
1%TTC溶液使用操作规程:
目的:建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围:本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责:质检室质检员负责本操作规程的执行,质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
1%TTC溶液实验内容:
1.仪器与试剂:
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克,于1000ml三角瓶内,加入500ml纯化水,充分搅拌后,塞上棉塞,用牛皮纸包好,扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内,于115℃高压灭菌30分钟,取出放置至室温后,放入实验冰箱,备用(实验冰箱温度控制在1-4℃)。
2.3.使用时从实验冰箱取出,放置室温后,置水浴中加热,使融,全部融化后取出,放置约45℃时使用。
2.4.使用时,用75%乙醇擦瓶子外围,打开牛皮纸包扎外壳,在火焰附近慢慢旋下棉塞,左手拿培养皿,右手拿三角瓶,慢慢倾倒至培养皿中,每皿注入约
15ml完毕后,将棉塞在火焰上方烧烤数秒,立马塞入瓶口,包上牛皮纸外层,用线绳扎好,留下次使用。(此瓶培养基只允许使用两次,且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养)。
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文献和实验一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80mV的氧化还原物质,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲 (TTF),如下式: 生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性,并作为根系活力的指标。二、仪器与用具分光光度计;分析天平(感量0.1mg);恒温箱1台;研钵1套;100ml三角瓶;漏斗
中的氧自动氧化,所以 TTC 被广泛用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的 TTC 还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以 TTC 还原量能表示脱氢酶活性,并作为根系活力的指标。 二、实验材料、试剂与仪器设备 (一)实验材料 水培或砂培小麦、玉米等植物根系。 (二)试剂 1. 乙酸乙酯(分析纯)。 2. 次硫酸钠( Na 2 S 2 O 4 ,分析纯),粉末。 3. 1 % TTC 溶液:准确称取
2. 次硫酸钠(Na2 S2 O4 ),分析纯,粉末。 3. 1%TTC溶液 准确称取TTC1.0g,溶于少量水中,定容到100ml。用时稀释至各需要的浓度。 4. 磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7)。 5. 1mol/L硫酸 用量筒取比重1.84的浓硫酸55ml,边搅拌边加入盛有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000ml。 6. 0.4mol/L琥珀酸 称取琥珀酸4.72g,溶于水中,定容至100ml即成。
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