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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
液态/粉状
- 保存条件:
-20℃
- 克隆性:
多克隆
- 适应物种:
人,大鼠,小鼠,兔.......
- 宿主:
Goat,Rabbit,Mouse
- 应用范围:
科研使用
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
来电咨询
- 抗体英文名:
rTEV Protease
- 抗体名:
rTEV Protease 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶
重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更好的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0,30°C时可达到最佳活性,但在pH 6.0-8.5和温度4-30°C的广泛范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。
表1. 不同温度下rTEV酶切活性
反应时间
不同温度下剪切活性(%)
4°C
16°C
21°C
30°C
1 h
34
58
56
70
2 h
58
80
78
90
3 h
71
99
99
99
3.5h
84
99
99
99
影响天然TEV酶活性的常见因素:1)PMSF和AEBSF(1 mM),TLCK(1 mM),Bestatin(1 mg/ml)、Pestatin A(1 mM),EDTA(1 mM)以及E-64(3 mg/ml),以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响;2)Zn离子(>5 mM)对rTEV活性有抑制;3)与半胱氨酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。
rTEV Protease 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶产品性质
来源(Source)
大肠杆菌
外观(Appearance)
无菌液体
酶浓度(Concentration)
1.5 U/μl
活性定义(Activity)
在1×rTEV Buffer(20 mM Tris,pH8.0,0.5 mM EDTA,1mM DTT)中,30℃反应1h,剪切>85%的20 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
纯化(Purification )
Ni亲和纯化
纯度(Purity)
>95%(by SDS-PAGE)
产品组分
组分编号
组分名称
产品货号/规格
20403ES80(1000U)
20403-A
rTEV Protease(1.5 U/μl)
667μl
20403-B
rTEV Buffer 1(20×)
2 ml
20403-C
rTEV Buffer 2(1000×)
50μl
rTEV Protease 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。
收到产品后,短期使用完,请放到-20 ºC可保存6个月。若长期使用,放到-70℃,至少可保存12个月。强烈建议收到货或者第一次使用时将各组分分装保存,特别是rTEV Protease ,以及rTEV Buffer 2(1000×),避免反复冻融。
应用实例
1. 在EP管中配制如下反应体系,
融合蛋白
20 μg
rTEV Protease (1.5 U/μl)
3-10μl
rTEV buffer 1(20×)
7.5 μl
rTEV Buffer 2(100×)*
1.5μl
DDW(超纯水)
up to 150 μl
“*”注:1.取适量的rTEV Buffer 2(1000×)做10倍稀释到rTEV Buffer 2(100×),再根据以上体系加量。
2. 30℃孵育,在1、2、4、6小时分别吸出30 μl上述反应液,置于单独的EP管中。
3. 向上述EP管中加入30 μl 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取40 μl进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,请延长反应时间,并增加rTEV酶用量。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
rTEV Protease 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶yb-2432R APG7自噬相关蛋白7抗体 浓度1mg/ml
yb-11071R ANTXR2炭疽毒素受体2抗体 浓度1mg/ml
yb-4008R ATG4C自噬相关蛋白4C抗体 浓度1mg/ml
yb-4005R APG5L自噬蛋白5/细胞凋亡的特异性蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-4006R ARSA芳基硫酸酯酶A抗体 浓度1mg/ml
yb-2249R ACA11拟南芥ACA11抗体 浓度1mg/ml
yb-2247R AHA3AHA3抗体(拟南芥) 浓度1mg/ml
yb-3064R Phospho-ATP1A1 (Ser23)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体 浓度1mg/ml
yb-5436R phospho-ASK1 (Ser83)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-5162R AADACL1中性胆固醇酯水解酶1抗体 浓度1mg/ml
yb-1612R Astrocyte人星形胶质细胞抗体 浓度1mg/ml
yb-2406R Aldolase A醛缩酶A抗体 浓度1mg/ml
yb-1471R Annexin VI膜粘连蛋白6抗体 浓度1mg/ml
yb-0872R beta-Amyloid(25-35)β淀粉样肽(25-35)抗体 浓度1mg/ml
yb-1707R Angiotensin I血管紧张素I抗体 浓度1mg/ml
yb-0995R Adrenomedullin肾上腺髓质素抗体(N端20肽) 浓度1mg/ml
yb-1442R Arfaptin 2ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体 浓度1mg/ml
yb-1705R AVPR2精氨酸加压素受体2抗体 浓度1mg/ml
yb-6741R ASC凋亡相关斑点样蛋白ASC抗体 浓度1mg/ml
yb-2754R Afadin丝状肌动蛋白结合蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-1636R Antithrombin III 抗凝血酶3抗体 浓度1mg/ml
ybm-0945M Serum albumin (3F4)人血清白蛋白单克隆抗体 浓度1mg/ml
yb-2688R ApoA4载脂蛋白A4抗体 浓度1mg/ml
yb-2201R phospho-GEF H1 (Ser886)磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-3072R phospho-Afadin (Ser1721)磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12526R ARPC1A肌动蛋白相关蛋白2/3亚型1A抗体 浓度1mg/ml
yb-9749R ANKRD32锚蛋白重复结构域蛋白32抗体 浓度1mg/ml
yb-9754R ATXN7L3B共济失调7样蛋白3B抗体 浓度1mg/ml
yb-9107R POP1感染性蛋白唯一蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-9136R ASB5含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族5抗体 浓度1mg/ml
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