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- HL6002
- 2025年07月16日
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英文名称：
规格：10ml×4
甲基红指示剂盒产品说明与用途：用于甲基红试验
甲基红指示剂盒使用操作规程：
目的：建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围：本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
甲基红指示剂盒实验内容：
1．仪器与试剂：
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克，于1000ml三角瓶内，加入500ml纯化水，充分搅拌后，塞上棉塞，用牛皮纸包好，扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内，于115℃高压灭菌30分钟，取出放置至室温后，放入实验冰箱，备用（实验冰箱温度控制在1－4℃）。
2.3.使用时从实验冰箱取出，放置室温后，置水浴中加热，使融，全部融化后取出，放置约45℃时使用。
2.4.使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开牛皮纸包扎外壳，在火焰附近慢慢旋下棉塞，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约
15ml完毕后，将棉塞在火焰上方烧烤数秒，立马塞入瓶口，包上牛皮纸外层，用线绳扎好，留下次使用。（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。
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文献和实验可采用vp试验及甲基红试验。产气杆菌能使丙酮酸脱羧、氧化（在碱性溶液中）生成二乙酰，后者可与含胍基的化合物反应，生成红色化合物，称vp阳性。大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，vp阴性。 甲基红试验 产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物，培养液ph＞5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，为甲基红试验阴性，大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液呈酸性ph＜5.4，指示剂甲基红呈红色，称甲基红试验（methyl red test,mr）阳性。 枸橼酸盐利用试验（citrate
大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖⊕，为区分两菌可采用 vp 试验及甲基红试验。产气杆菌能使丙酮酸脱羧、氧化（在碱性溶液中）生成二乙酰，后者可与含胍基的化合物反应，生成红色化合物，称 vp 阳性。大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸， vp 阴性。 甲基红试验 产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物，培养液 ph ＞ 5.4 ，甲基红指示剂呈桔黄色，为甲基红试验阴性，大肠杆菌分解葡萄糖产生
在少量蒸馏水中，再稀释至1000ml。 4. 混合指示剂 1份0.1％甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。 5．40%氢氧化钠溶液 40g氢氧化钠溶解于蒸馏水中，再稀释至100ml。 6．0.05mol／L盐酸标准溶液 （四）操作步骤 1．样品处理 精密称取0.2～2.0g固体样品或2～5g半固体样品或吸取10～20ml液体样品（约相当氮30～40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加人0.2g硫酸铜、3g硫酸
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