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上海信裕
Actin肌动蛋白计数:培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,Actin肌动蛋白所以要进行细胞计数,计数结果以每毫升细胞数表示,细胞计数的原理和方法怀与血细胞计数相同,血细胞计数器;手工计数细胞,COUI TER计数仪;人工计数。
1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液,10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶(预热20分钟左右)2ml消化,轻轻摇晃,Actin肌动蛋白直至肉眼见单层细胞呈块状脱落(或在显微镜下观察细胞之间分离),立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化,轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清,加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中,每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液,正常情况下2-3天就可以长满,期间不用换液。
Actin肌动蛋白的传代方法:首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%,不需要长满,就准备传代。倒掉旧的培养基,再用已经高压灭菌过的PBS洗1-2次,我用的是25平方厘米的培养瓶,加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤,再用一次性过滤器过滤除菌,Actin肌动蛋白再分装成1ml的小包装,刚好每次用完一个,避免每次反复冻存,会使胰酶的活性下降),加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化,一旦发现细胞开始变园收缩,大约1-3分钟时间,必要时可以吹打帮助细胞分散,就立即加入培养基中和胰酶,如有EDTA最好要离心(800rpm,5min),弃上清夜,Actin肌动蛋白再加入完全培养基吹匀,再分瓶,一般一瓶可以分2-3瓶。放入5%的CO2培养箱,37度培养24小时后观察。
xyE748Hu 亲核素α2(KPNα2)检测试剂盒 检测范围
xyE779Hu 膜联蛋白A9(ANXA9)检测试剂盒 检测范围
xyE780Hu 膜联蛋白A10(ANXA10)检测试剂盒 检测范围
xyE842Hu 白介素1ζ(IL1ζ)检测试剂盒 检测范围
xyE909Hu 组蛋白脱乙酰基酶9(HDAC9)检测试剂盒 检测范围
xyE913Hu 沉默调节蛋白3(SIRT3)检测试剂盒 检测范围
xyE915Hu 沉默调节蛋白5(SIRT5)检测试剂盒 检测范围
xyE917Hu 沉默调节蛋白7(SIRT7)检测试剂盒 检测范围
xyF196Hu 岩藻糖基转移酶6(FUT6)检测试剂盒 检测范围
xyF205Hu 腺苷酸激酶3(AK3)检测试剂盒 检测范围
xyF255Hu 钙蛋白酶6(CAPN6)检测试剂盒 检测范围
xyF264Hu 羰基还原酶3(CBR3)检测试剂盒 检测范围
xyF295Hu 封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒 检测范围
xyF317Hu 羧肽酶A4(CPA4)检测试剂盒 检测范围
xyF387Hu 二肽酶3(DPEP3)检测试剂盒 检测范围
xyF396Hu 脊椎蛋白2(SPON2)检测试剂盒 检测范围
xyF540Hu 吻素受体(KISS1R)检测试剂盒 检测范围
xyF593Hu 多聚蛋白2(MMRN2)检测试剂盒 检测范围
xyF605Hu 黑素皮质激素5受体(MC5R)检测试剂盒 检测范围
xyF656Hu 磷酸二酯酶10A(PDE10A)检测试剂盒 检测范围
xyF714Hu 泛酸激酶4(PANK4)检测试剂盒 检测范围
xyF754Hu 过氧化还原酶4(PRDX4)检测试剂盒 检测范围
xyF756Hu 过氧化还原酶6(PRDX6)检测试剂盒 检测范围
xyF819Hu 张力蛋白3(TNS3)检测试剂盒 检测范围
xyF863Hu 胞裂蛋白3(SEPT3)检测试剂盒 检测范围
xyF952Hu Nesprin 2蛋白(Nesp2)检测试剂盒 检测范围
xyF953Hu Nesprin 1蛋白(Nesp1)检测试剂盒 检测范围
xyF994Hu 网状蛋白4(RTN4)检测试剂盒 检测范围
xyG011Hu 甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)检测试剂盒 检测范围
xyG191Hu N-乙酰转移酶1(NAT1)检测试剂盒 检测范围
xyG239Hu 外生骨疣蛋白1(EXT1)检测试剂盒 检测范围
xyG300Hu 小脑肽1(CBLN1)检测试剂盒 检测范围
xyG342Hu 色胺酸羟化酶1(TPH1)检测试剂盒 检测范围
xyG343Hu 色胺酸羟化酶2(TPH2)检测试剂盒 检测范围
xyG356Hu 3-羟基丁酸脱氢酶1(BDH1)检测试剂盒 检测范围
xyG439Hu 小白蛋白(PVALB)检测试剂盒 检测范围
xyG465Hu 腺苷高半胱氨酸水解酶(AHCY)检测试剂盒 检测范围
xyG476Hu 组氨酸脱羧酶(HDC)检测试剂盒 检测范围
xyG529Hu 溶血卵磷脂酰基转移酶1(LPCAT1)检测试剂盒 检测范围
xyG530Hu 溶血卵磷脂酰基转移酶2(LPCAT2)检测试剂盒 检测范围
xyG531Hu 溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)检测试剂盒 检测范围
xyG610Hu 芳基硫酸酯酶B(ARSB)检测试剂盒 检测范围
1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液,10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶(预热20分钟左右)2ml消化,轻轻摇晃,Actin肌动蛋白直至肉眼见单层细胞呈块状脱落(或在显微镜下观察细胞之间分离),立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化,轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清,加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中,每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液,正常情况下2-3天就可以长满,期间不用换液。
Actin肌动蛋白的传代方法:首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%,不需要长满,就准备传代。倒掉旧的培养基,再用已经高压灭菌过的PBS洗1-2次,我用的是25平方厘米的培养瓶,加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤,再用一次性过滤器过滤除菌,Actin肌动蛋白再分装成1ml的小包装,刚好每次用完一个,避免每次反复冻存,会使胰酶的活性下降),加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化,一旦发现细胞开始变园收缩,大约1-3分钟时间,必要时可以吹打帮助细胞分散,就立即加入培养基中和胰酶,如有EDTA最好要离心(800rpm,5min),弃上清夜,Actin肌动蛋白再加入完全培养基吹匀,再分瓶,一般一瓶可以分2-3瓶。放入5%的CO2培养箱,37度培养24小时后观察。
xyE748Hu 亲核素α2(KPNα2)检测试剂盒 检测范围
xyE779Hu 膜联蛋白A9(ANXA9)检测试剂盒 检测范围
xyE780Hu 膜联蛋白A10(ANXA10)检测试剂盒 检测范围
xyE842Hu 白介素1ζ(IL1ζ)检测试剂盒 检测范围
xyE909Hu 组蛋白脱乙酰基酶9(HDAC9)检测试剂盒 检测范围
xyE913Hu 沉默调节蛋白3(SIRT3)检测试剂盒 检测范围
xyE915Hu 沉默调节蛋白5(SIRT5)检测试剂盒 检测范围
xyE917Hu 沉默调节蛋白7(SIRT7)检测试剂盒 检测范围
xyF196Hu 岩藻糖基转移酶6(FUT6)检测试剂盒 检测范围
xyF205Hu 腺苷酸激酶3(AK3)检测试剂盒 检测范围
xyF255Hu 钙蛋白酶6(CAPN6)检测试剂盒 检测范围
xyF264Hu 羰基还原酶3(CBR3)检测试剂盒 检测范围
xyF295Hu 封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒 检测范围
xyF317Hu 羧肽酶A4(CPA4)检测试剂盒 检测范围
xyF387Hu 二肽酶3(DPEP3)检测试剂盒 检测范围
xyF396Hu 脊椎蛋白2(SPON2)检测试剂盒 检测范围
xyF540Hu 吻素受体(KISS1R)检测试剂盒 检测范围
xyF593Hu 多聚蛋白2(MMRN2)检测试剂盒 检测范围
xyF605Hu 黑素皮质激素5受体(MC5R)检测试剂盒 检测范围
xyF656Hu 磷酸二酯酶10A(PDE10A)检测试剂盒 检测范围
xyF714Hu 泛酸激酶4(PANK4)检测试剂盒 检测范围
xyF754Hu 过氧化还原酶4(PRDX4)检测试剂盒 检测范围
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xyF819Hu 张力蛋白3(TNS3)检测试剂盒 检测范围
xyF863Hu 胞裂蛋白3(SEPT3)检测试剂盒 检测范围
xyF952Hu Nesprin 2蛋白(Nesp2)检测试剂盒 检测范围
xyF953Hu Nesprin 1蛋白(Nesp1)检测试剂盒 检测范围
xyF994Hu 网状蛋白4(RTN4)检测试剂盒 检测范围
xyG011Hu 甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)检测试剂盒 检测范围
xyG191Hu N-乙酰转移酶1(NAT1)检测试剂盒 检测范围
xyG239Hu 外生骨疣蛋白1(EXT1)检测试剂盒 检测范围
xyG300Hu 小脑肽1(CBLN1)检测试剂盒 检测范围
xyG342Hu 色胺酸羟化酶1(TPH1)检测试剂盒 检测范围
xyG343Hu 色胺酸羟化酶2(TPH2)检测试剂盒 检测范围
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xyG476Hu 组氨酸脱羧酶(HDC)检测试剂盒 检测范围
xyG529Hu 溶血卵磷脂酰基转移酶1(LPCAT1)检测试剂盒 检测范围
xyG530Hu 溶血卵磷脂酰基转移酶2(LPCAT2)检测试剂盒 检测范围
xyG531Hu 溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)检测试剂盒 检测范围
xyG610Hu 芳基硫酸酯酶B(ARSB)检测试剂盒 检测范围
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