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上海钰博
简 介:G-5无血清添加剂用于星形细胞表型的胶质细胞(正常型和肿瘤型)的培养和表达
保存条件:-5℃至-20℃下储存
使用说明:用于细胞培养,不用于诊断和治疗
配制每升培养基,G-5添加剂(100×)应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入: 胰化蛋白胨10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。G-5添加剂(100×)用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
G-5添加剂(100×)1、LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素,并且倒好板。 LB固体培养基倒板 1。配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
G-5添加剂(100×)2、抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
G-5添加剂(100×)3、倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
G-5添加剂(100×)4、保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。 配400ml的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的。
SK-BR-3 乳腺腺癌
HCC 子宫高分化鳞癌
MDA-MB-435S 乳腺管癌
JAR 胎盘绒毛癌
T47D 乳腺管癌
RD 恶性胚胎横纹肌瘤
ybL-100 乳腺细胞
BT-325 神经胶质瘤
SMC-1 恶性胸膜间皮瘤
SK-N-SH 神经母细胞瘤
A2 肺癌
SHG-44 胶质瘤
95-D 高转移肺癌
A375 恶性黑色素瘤
Calu-3 肺腺癌 (胸膜渗出液)
Bowes Melanoma 黑色素瘤
LTEP-a-2 肺腺癌
MM96L 黑色素瘤
SH-77 小细胞肺癌
J-111 单核细胞白血病
NCI-H446 小细胞肺癌
Dami 巨核细胞
SPC-A-1 肺腺癌
CHMas 肥大细胞白血病
SGC-7901 胃腺癌
HEL 红细胞白血病 (Erythroleukemia)
BGC-823 低分化胃腺癌
HL-60 原髓细胞白血病 (Promyelocytic lenukemia)
LoVo 结肠腺癌
Hut-78 皮肤T细胞淋巴瘤
Ls-174-T 结肠腺癌
按照培养基的成分来分 培养基按其所含成分,G-5添加剂(100×)可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。G-5添加剂(100×)按照培养基的物理状态分 培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。G-5添加剂(100×)按照微生物的种类分 培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类G-5添加剂(100×).按照培养基用途分 培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基 。
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文献和实验L-glutamine - - 2mM 2mM - 200mM B-27 - - - 1× 1× 1× N2 - - - 1× 1× 1× HEPES - - - 10mM 10mM - BSA(v/v) - - - - - 0.05% 抗坏血酸 - - - - - 50 µg
25ng/ml Activin A - - - 100ng/ml - - - - - C687 ROCKi - - 10μM - - - - - - iPSCs 培养和传代 1、将 100mm 培养皿包被 5ml 0.1%(w/v)的明胶,室温静置 15min 至明胶凝固。 2、在明胶上接种丝裂霉素处理过的 MEFs 细胞悬浮液,细胞数约为 1.8×106 个。放置在 37℃
自己需要的实验处理,处理结束后开始收蛋白,先用 1×PBS 将细胞洗两次,每次吸尽上清。2、每孔加入 200ul NETN 裂解液,冰上裂解 15min3、用细胞刮刮细胞,将细胞收集于 1.5mlEP 管中,1500g,4℃,离心10min4、离心结束后可以在管底看到一小团接近透明的沉淀,小心吸尽上清,用 1ML NETN buffer 洗沉淀一次或两次,1500g,4℃,离心 10min5、吸尽上清,小心吸,沉淀容易被吸走,加入 0.2M HCL 100ul (浓盐酸的浓度为 12M)冰水裂解 30
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