Cell Proliferation ELISA, BrdU

Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)计数：培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)所以要进行细胞计数，计数结果以每毫升细胞数表示，细胞计数的原理和方法怀与血细胞计数相同，血细胞计数器；手工计数细胞，COUI TER计数仪；人工计数。


1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液，10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶（预热20分钟左右）2ml消化，轻轻摇晃，Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)直至肉眼见单层细胞呈块状脱落（或在显微镜下观察细胞之间分离），立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化，轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清，加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中，每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液，正常情况下2-3天就可以长满，期间不用换液。
Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)的传代方法：首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%，不需要长满，就准备传代。倒掉旧的培养基，再用已经高压灭菌过的PBS洗1－2次，我用的是25平方厘米的培养瓶，加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶－0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤，再用一次性过滤器过滤除菌，Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)再分装成1ml的小包装，刚好每次用完一个，避免每次反复冻存，会使胰酶的活性下降），加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化，一旦发现细胞开始变园收缩，大约1－3分钟时间，必要时可以吹打帮助细胞分散，就立即加入培养基中和胰酶，如有EDTA最好要离心（800rpm,5min)，弃上清夜，Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)再加入完全培养基吹匀，再分瓶，一般一瓶可以分2－3瓶。放入5%的CO2培养箱，37度培养24小时后观察。
xy1137 J774A1（单核细胞巨噬细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1138 SPA-A1（肺腺癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1139 A673（横纹肌瘤细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1140 L-02（正常肝细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1141 7721（7721肝癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1142 SK-N-SH（神经母细胞瘤）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1143 HL-60（白血病原髓细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1144 ScaBER（膀胱鳞癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1145 WISH（羊膜细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1146 H08910（卵巢癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1147 Bcap-37（乳腺癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1148 Hela(宫颈癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1149 PC-3（人前列腺癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1150 SGC7901（胃腺癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1151 786－0（肾透明细胞腺癌）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1152 6T－CEM（T细胞白血病）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1153 Jecket（淋巴瘤细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1154 JAR（胚绒毛癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1155 PC-12未分化（大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤） 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1156 WI-38（人二倍体胚肺细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1157 THP-1（人单核细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1158 T-24（膀胱变移细胞癌）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1159 A375（人类恶性黑色素瘤）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1160 CHRF（人巨核细胞白血病）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1161 K562（慢性髓原白血病）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1162 RD（恶性胚胎横纹肌瘤）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1163 CNE（鼻咽癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1164 RT4（膀胱癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1165 J82（膀胱癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1166 SHG44（胶质瘤细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1167 LoVo（人结肠癌细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1168 V79(中国仓鼠肺细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1169 U937（组织细胞淋巴瘤）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1170 PT-67（病毒转染小鼠细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周
xy1171 HEL（红白血病细胞）. 品牌ATCC 规格25毫升/株. 货期1-2周