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上海钰博
人膀胱平滑肌细胞完全培养基中已包含了高质量的血清和人膀胱平滑肌细胞所需生长因子,可直接用于人膀胱平滑肌细胞的培养。
注意事项:
1. 培养基为低温长途运输,收到后请先查看是否有漏液、破损或污染等,若出现问题请及时和我们联系。
2. 用75%的酒精擦拭瓶身,4℃保存。
A、 人膀胱平滑肌细胞完全培养基划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因:
(1) 平板上有过多的水分;
(2) 划线时接种环未经反复灼烧。
(3) 多区划线,三区或四区划线。
B、 人膀胱平滑肌细胞完全培养基涂布和倾注的区别:
涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,影响计数的准确性。
涂布更为准确,但不利于观察菌落的状态。
C、 人膀胱平滑肌细胞完全培养基培养基配制时应注意的问题:
(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。
(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。
(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。
D、 人膀胱平滑肌细胞完全培养基平板的保存:大多数平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
E、 人膀胱平滑肌细胞完全培养基产品的保存:
(1) 干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。
(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。
(3) 抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。
(4) 兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。
F、人膀胱平滑肌细胞完全培养基观察时间的掌握:按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。
yb0156 小鼠前成骨细胞,MC-3T3细胞
yb0157 小鼠皮下结缔组织细胞,L Wnt-3A细胞,
yb0158 小鼠皮下结缔组织细胞,A9细胞
yb0159 小鼠皮肤细胞,JB6-C41细胞
yb0160 小鼠皮肤细胞,JB6-C30细胞
yb0161 小鼠皮肤黑色素瘤细胞,B16-F10细胞,
yb0162 小鼠胚胎纤维细胞,STO细胞
yb0163 小鼠胚胎细胞,NIH/3T3细胞,
yb0164 小鼠胚胎肝细胞,BNL CL.2细胞,
yb0165 小鼠胚胎干细胞瘤细胞,P19细胞
yb0166 小鼠胚胎干细胞,CmESCs-11细胞
yb0167 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) NIH-3T3-L1细胞,
yb0168 小鼠胚胎成纤维细胞,T6-Swiss albino细胞
yb0169 小鼠胚胎成纤维细胞,SK-MEL-1细胞
yb0170 小鼠胚胎成纤维细胞,Psi2 DAP细胞
yb0171 小鼠胚胎成纤维细胞,PA12细胞
yb0172 小鼠胚胎成纤维细胞,NIH3T3细胞
yb0173 小鼠胚胎成纤维细胞,MEF细胞
yb0174 小鼠胚胎成纤维细胞,MC3T3-L1细胞
yb0175 小鼠胚胎成纤维细胞,C3H/10T1/2细胞
yb0176 小鼠胚胎成纤维细胞,BALB/3T3clone A31细胞
yb0177 小鼠胚胎成纤维细胞,3T6-Swiss albino细胞
yb0178 小鼠胚胎成纤维细胞,3T3-L1细胞,
yb0179 小鼠胚胎成纤维细胞,3T3 clone A31细胞
yb0180 小鼠胚胎成纤维细胞,10T1细胞
yb0181 小鼠胚成纤维包装细胞,ψ2细胞
yb0182 小鼠胚成纤维包装细胞,PA317细胞
yb0183 小鼠逆转录病毒包装株 PT-67细胞
yb0184 小鼠脑微血管内皮细胞株 BEND.3细胞
yb0185 小鼠脑微血管内皮细胞,Bend3细胞
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文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
指培养细胞时,具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件,而含有满足各种营养缺陷突变型要求的培养基。其组成可按生物种类和目的而异,但一般是由酵母浸膏、麦芽汁、牛肉膏、蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白氨基酸等营养物中选几种营养物配合而成。完全培养基用于短期内无性增殖大量细胞,以及分离和增殖营养缺陷突变型。
1、麻醉后消毒,下腹正中切口于膀胱颈(结扎处远端约1~2cm),严格无菌操作取出标本、手术台位于超净台旁2、在超净台,40u/ml庆大霉素溶液中浸泡5分钟3、生理盐水漂洗1次4、D-hanks液漂洗1次5、放入D-hanks液中,除去粘膜、粘膜下及浆膜如果是Shame组兔,以10ml注射器抽取约8ml D-hanks液,于粘膜层下注射起泡后,剪去粘膜层,直接剪取平滑肌组织,弃浆膜层及其上未剪下之肌组织。new: 如果是不全BOO兔,则可将膀胱剪成宽约0.5cm之条状,撕去粘膜层后,助手以一眼
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