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上海乔羽生物有限公司
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250ml
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文献和实验4.DEPC-water(抑制 RNA 酶活性) 5. 3M NaAc (pH5.2) 6. 96% 乙醇 7. 70% 乙醇步骤: 1. 抽提缓冲液 65℃ 预热; 2. 加菌体到已经预热的缓冲液(700ul)中混匀,65℃,10 min; 3. 加酚/氯仿/异戊醇(25:24:1),振荡,离心 12,000rpm,10 min; 4. 取上清,加氯仿/异戊醇(24
)。将此溶液及 CTAB/NaCl 溶液加热至 65 ℃。对于每克新鲜的叶组织大约需要 4 mL 的 2-巯基乙醇/CTAB 抽提液和 0.4~0.5 mL 的 CTAB/NaCl 溶液;2. 用液氮 (-196 ℃) 或干冰 (-78 ℃) 冷冻匀浆器,将植物组织粉碎成为细粉,然后将冷冻的组织转移到一个含有机溶剂的试管或烧瓶中;3. 往粉碎的组织中加入预热的 2-ME/CTAB,混合使之充分湿润,于 65 ℃ 温育 10~60 min,期间不时混匀;4. 用等体积的 24:1 氯仿/异戊醇抽提匀浆
茶属植物2个亚属当中的大部分组.表1 山茶属植物DNA抽提实验材料Table 1 Experimental materials from Camellia plants1.2 DNA抽提试剂 (1)1.5% CTAB液(CTAB粉末15 g/L, Tris-HCl 0.075 mol/L ,NaCl 61.4 g/L );(2)10%的CTAB液 (CTAB粉末 100 g/L ,NaCl 40.95 g/L );(3) β-巯基乙醇(体积分数>99%);(4)氯仿/异戊醇液(体积比 24∶
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