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- 2025年07月12日
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100
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上海乔羽生物有限公司
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250ml
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文献和实验8. 加入 1 ul RNaseA（10 mg/mL），37℃ 处理 1 hr 9. 用酚（pH8.0）: 氯仿: 异戊醇 (25:24:1) 和氯仿: 异戊醇 (24:1) 各抽提 1 次（10,000 rpm，4℃ 离心 5 min） 10. 取上清，1/10V 3M NaAc,2.5V 体积的无水乙醇, -70℃ 沉淀 30 min 以上 11. 沉淀用 75% 乙醇漂洗，风干, 溶于 200 ulTE 中，-20 ℃ 保存备用 12. DNA 提取
】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
大量获取玉米叶片DNA为例的实验流程： （1）选取适量的玉米幼苗新鲜叶片，以纱布捆扎，做好标记，置于液氮中保存； （2）研钵以液氮预冷，将玉米叶片置于研钵中，倒入液氮，迅速研磨至粉末级，期间时时加入液氮，防止研磨过程中DNA被降解； （3）将研磨好的粉末移入灭菌后的50mL抽提试管中，用移液管加入10mL月桂酸钠抽提缓冲液，反复缓慢的摇匀； （4）用移液管向50mL抽提试管中加入等体积（10mL）酚：氯仿：异戊醇（25:24:1），反复缓慢的摇匀； （5）12000 rpm，4°C
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