Sigma货号H0262-10VL现货Hybri-Max™

Sigma货号H0262-10VL现货Hybri-Max™ HAT培养基补充物(50╳)™上海睿安生物13611631389

1964年Littlefield首先发明了HAT(H-Hypoxanthine次黄嘌呤，A-Aminopterin甲氨喋呤，T--Thymidine 胸腺嘧啶核苷)培养基的选择培养。

HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的。

简介

缺失这两种酶的细胞，在HAT培养基中，应该不能生存，只有发生融合或者其他情况下，才能是细胞重新获得用旁路途径进行DNA合成能力。

HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对￡具有合成DNA原料的核苷酸的形成上，在细胞内具有起始合成途径(denovopathway)和中间合成途径(salvagepa-th■way)。中间合成途径包括:通过HGPRT的催化作用把次黄嘌呤转化成次黄嘌呤核苷-磷酸(IMP)，通过TK的催化把胸腺嘧啶核苷转化成脱氧胸腺嘧啶核苷-磷酸(dTMP)，再进一步合成核酸。由于氨基蝶呤可阻碍起始合成途径，所以培养基中含有它时，细胞便只有中间合成途径，所以必须供给核苷酸。至于缺失中间合成途径的细胞，可失去增殖能力臻于死亡。根据这一点，不仅把混存于细胞群中的正常细胞，通过试管内培养进行选择，例如嘌呤的中间合成途径缺失株和嘧啶的中间合成途径缺失株，由于可以互补，所以两者的杂种细胞，即使在氨基蝶呤的存在条件下也可以增殖。在这种情况下，利用HAT培养基可对杂种细胞进行选择。次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷可作为中间合成途径的原料而进行添加。

应用

HAT培养基添加剂(50╳) Hybri-Max^™已用于:

• 次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(HPRT)缺陷型克隆体的选择和验证
• mAbs(单克隆抗体)制备
• 基于荧光素酶的生物测定(LUC)

重悬:用10ml无菌细胞培养基重悬小瓶的内容物。 储备溶液足以制备500ml培养基。 最终工作浓度:100 μM次黄嘌呤， 0.4μM次黄嘌呤，16μM胸苷。

应用:

HAT Media Supplement (50×) Hybri-Max^™ has been used:

• in the selection and validation of hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HPRT)-deficient clones
• in the generation of mAbs (monoclonal antibodies)
• in the luciferase-based bioassay (LUC) assay

重悬:10ml无菌细胞培养基可复原一小瓶本品。储存液足以制备500ml培养基。最终工作浓度:100μM次黄嘌呤、0.4μM氨基蝶呤、16μM胸腺嘧啶核苷。

法律信息:Hybri-Max is a trademark of Sigma-Aldrich Co.LLC