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实验步骤:
1.样品细胞核蛋白的抽提,并测定其蛋白浓度。
2. EMSA样本的相互作用处理
实验分组设计:
A1. 不加核蛋白
A2. 加核蛋白和正常标记的探针A
A3. 加核蛋白和突变的探针A
A4. 加XXX抗体
A5. 加XXX抗体
3.将各组的预处理样品经6%非变性胶电泳,转NC膜,最后显影拍照。
4.分析实验结果 (提供显影图和探针序列)
实验周期:实验耗时长短:30个工作日.
客户提供:
1.客户只提供活的细胞样本(细胞数量1X108)
2.CHIP和EMSA抗体及信息:
3.检测基因名称 :XXX XXX
4.细胞样本运输:干冰运输
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凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(EMSA,electrophoretic mobility shift assay),是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验,也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。 一、实验原理 EMSA主要基于蛋白-探针复合物在在凝胶电泳过程中迁移较慢的原理。根据实验设计特异性和非特异性探针,当核酸探针与样本蛋白混合孵育时,样本中可以与核酸探针结合的蛋白质与探针形成蛋白-探针复合物;这种复合
【求助】转录因子可以用荧光定量PCR测其含量吗?能说明问题吗?
skybjp123 转录因子可以用荧光定量PCR测其含量吗?能说明问题吗?谢谢啊~~~ xdb86 不能说明问题,因为转录因子不是含量高活性就高。需要用荧光素酶报告基因、EMSA、ChIP等方法研究转录因子。 skybjp123 不知道western blot 方法测定转录因子的蛋白含量,拿加药组和未处理组进行含量的对比,来说明药物通过这个转录因子来影响目的物质,这样的设计可以吗?谢谢啊~
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