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- 2025年12月30日
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- 服务名称：
原代细胞分离培养及鉴定
- 提供商：
富衡生物
原代细胞分离培养、分化及鉴定（鉴定可提供流式细胞仪检测、免疫细胞化学、RT-PCR、蛋白免疫印迹等多种方法检测）
客户提供
1. 除1640和DMEM外的培养基，生长因子及分化因子。
2. 详细说明进行原代培养的组织，并说明组织是由顾客提供还是本公司提供；对于一些常见的原代培养组织，因为保存运输的不便可能会降低原代培养的成功率。
3. 鉴定所需检测试剂盒、一抗等
提交物品
实验报告，细胞图片，剩余抗体及冻存或处于对数生长期的细胞
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大鼠心肌细胞-cTnT抗体验证
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文献和实验37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； 二、新生SD大鼠心房肌细胞的α-actin免疫荧光鉴定：1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育
一、形态学鉴定 1. 在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征2. 细胞染色检查 ：a) 将无菌玻片置于细胞培养皿中，加细胞悬液后培养；b) 待细胞长满玻片后取出，用PBS清洗，之后放于载玻片上，待其自然干燥；c) 用PBS/甲醇（1:1）固定15分钟；d) 弃固定液，加合适的染色液染色；e) 染色完毕后用清水洗净，置于空气中干燥，f) 干燥后，用二甲苯透明，光学树脂封片后观察。二、免疫组织细胞化学鉴定 1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片；2. PBS
细胞，吸管轻轻吹打细胞，使之形成单细胞悬液，计数后以104个/ mL接种75mL培养瓶中，于5℅CO2 培养箱, 37℃培养，完成一次传代。此后每隔两天半量换液，5-7天机械分离细胞传代1次。期间倒置显微镜下观察细胞的生长状况。胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定。
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