转录酶/ Transcriptor Reverse Tran

转录酶

别名:
reverse transcriptase, RT-PCR

一般描述

一种重组逆转录酶，用于在热循环仪和实时PCR仪器上进行两步RT-PCR，以稳定转录最高达14 kb的RNA片段。
在逆转录病毒中，如人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1），逆转录酶是核心酶。HIV-1 RT由两个亚单位66 kDa和51 kDa（p66和p5l组成）。一种HERV-K家族的人类内源性逆转录病毒，可编码逆转录（RT）酶。

应用

Transcriptor逆转录酶设计用于使用传统热循环仪和实时PCR仪器（例如LightCycler^®仪器）转录各种来源的RNA（mRNA、总RNA、病毒RNA,以及体外-转录RNA），用于以下应用：

• 合成第一链cDNA用于后续扩增反应
• 富含GC的RNA模板的RT-PCR
• cDNA合成期间Cy3、Cy5、DIG、生物素和氨基烯丙基标记
• 根据RACE检索和克隆mRNA的第5′端和第3′端
• 带大量嵌入物的cDNA文库的生成
• DNA双脱氧测序
• RNA测序
• DNA片断3′端标记
• 用于基因组足迹的单链探针的生成
• 人类乳突病毒E6的RNA、皮层和纹状组织、贝克肌营养不良样本的肌肉活检以及卵母细胞和人类大脑微血管内皮细胞(hCMVEC)的miRNA的逆转录。

生化/生理作用

人类免疫缺陷病毒1型逆转录酶（HIV-1 RT）对于将单链病毒RNA催化转化为整合到宿主细胞染色体中的双链线性DNA至关重要。

特点和优势

• 实现两步RT-PCR的高度灵敏度。

转录器逆转录酶用于常规热循环仪和实时PCR仪器（例如，LightCycler^®仪器）。

• 获取更多全长转录本，最大14 kb。

可以生成带有大插入片段的cDNA文库。

• 反向转录困难的模板。

该酶在高温下工作良好，从而克服了RNA二级结构（如富含GC的RNA模板），有利于优化反应条件。

• 高效标记cDNA。

在cDNA合成过程中纳入Cy3-、Cy5-、DIG-、生物素或氨基烯丙基标记的核苷酸。