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修饰胰蛋白酶 (TPCK 处理)

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  • 2026年02月10日
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    ■  蛋白的酶解产物可用于质谱分析蛋白质组
    ■  可用于蛋白和多肽的鉴定
    ■  TPCK 处理去除胰凝乳蛋白酶活性
    ■  无蛋白酶污染


    概述
    修饰胰蛋白酶(TPCK处理)是一种丝氨酸肽链内切酶类,可特异性地切割赖氨酸和精氨酸残基的C端肽键(1)。经甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮(TPCK)处理的胰蛋白酶灭活了残留的胰凝乳蛋白酶活性。赖氨酸残基的ε-氨基基团进行乙酰化修饰,以防止酶自裂解。经 TPCK 处理过的胰蛋白酶,切割赖氨酸-脯氨酸和精氨酸-脯氨酸之间的肽键速率比切割其它氨基酸残基要慢得多(2)。


    来源
    来自牛(Bos taurus)胰脏


    反应条件
    1X修饰胰蛋白酶反应缓冲液[50mM Tris-HCl,20 mM CaCl2 (pH 8.0 @ 25°C)],25°C温育。


    随酶提供的试剂
    1X 修饰胰蛋白酶反应缓冲液


    比活性
    ~2.1 μmol/min/mg。


    分子量
    23,675 Da。


    重溶
    用20-200 μl的高纯度水溶解。快速自裂解效率随酶浓度不同而异。


    贮存条件
    本品以冻干粉形式提供,冻干粉从含醋酸钠和氯化钙的缓冲液中干燥而来。于 -20 ℃ 保存。
    以液态形式于 -20 ℃ 可保存 1 周,但液态形式保存会降低其活性。欲达到最佳效果,请使用新鲜重溶的蛋白酶。


    参考文献
    (1) Northrop, J.H. and Kunitz, M.(1931) Science , 73,262-263.
    (2) Perona, J.J. and Craik, C.S. (1995) Protein Sci ., 4,337-360.


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