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pMAL 载体

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    概述
    pMALTM 载体用于 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统（NEB #E8000）。利用“Ptac ”强启动子和 MBP 起始翻译信号，目的基因与 mal E 基因（编码 MBP 蛋白）融合表达。pMALTM -p5 和 pMALTM-c5 系列载体经过了改良，代替了 pMAL 试剂盒中原有的 pMALTM –p4 和pMALTM–c4 系列载体，使目的蛋白与 MBP 结合更紧密。同时，它们含有与 NEB 其它表达系统相兼容的多克隆位点。pMAL-c5 系列载体删除了 mal E 信号序列，融合蛋白将在细胞质中表达。pMAL-p5 系列载体含有 mal E 信号序列，它将引导融合蛋白穿越质膜。所有的载体都含有一段特异性蛋白酶识别位点序列，融合蛋白纯化后，通过蛋白酶可将目的蛋白与 MBP 切割分离。
    载体 pMAL-c5E 和 pMAL-p5E 含有一个肠激酶的特异性切割位点（NEB #P8070）。
    载体 pMAL-c5G 和 pMAL-p5G 含有一个 GenenaseTM I的特异性切割位点（NEB #P8075）。
    载体 pMAL-c5X 和 pMAL-p5X 含有一个 Factor Xa 蛋白酶的特异性切割位点（NEB #P8010）。


    来源
    pMAL 系列载体按照标准质粒纯化程序，从E.coli 2272 （dam+ dcm+ EcoK M– ）中提取。


    浓度
    145~240 μg/ml。


    贮存条件
    10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA。-20 ℃ 保存。


    参考文献
    (1) Guan, C. et al. (1987) Gene , 67, 21–30.
    (2) Maina, C.V. et al. (1988) Gene , 74, 365–373.
    (3) Nagai, K. et al. (1987). In R. Wu and L. Grossman
    (Eds.), Methods in Enzymology Vol. 153,(pp. 461–481). San Diego: Academic Press.
    (4) Riggs, P.D. (1990). In F.M. Ausubel et al. (Eds.), Current Protocols in Molecular Biology (pp. 16.6.1–16.6.12). New York: John Wiley &Sons, Inc.
    (5) La Vallie, E.R. and McCoy, J.M. (1990). In F.M. Ausubel et al. (Eds.), Current Protocols in MolecularBiology (pp.16.4.10–16.4.11). New York: JohnWiley & Sons, Inc.
    (6) Carter, P. et al. (1989) Proteins: Structure, Function,and Genetics , 6, 240–248.


    限制性图谱
    pMAL载体序列请登录 NEB 网站 www.neb.com 查询。



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