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文献和实验了,总共经过 28 个步骤,化学家可在试管内完全合成紫杉醇,当时可是一件大事!虽然最后合成的紫杉醇产率仅有 0.5%,不过化学家并不气馁,他们知道如果将合成的步骤缩短,就有商业化生产的价值。 经过多方寻觅,最后发现红豆杉的萃取物中含有浓度甚高的紫杉醇主结构 10-去乙醯巴卡亭III(简称 10-DAB),这种成分在少数红豆杉品种的枝叶中浓度高达 1,000 ppm(ppm,每公斤干重的毫克数),是紫杉醇的三倍以上。利用 10-DAB 作为合成的起始物,只要约 10 个步骤就可合成紫杉
转到新鲜的培养基中即可。在悬浮培养过程中应随时注意每一瓶中愈伤组织、细胞团生长的情况,挑选生长速度最快和特征最好的作为继代的材料,毫不可惜的丢掉那些不好的(生长缓慢、颜色不正等)材料,这样经过几代的选择,就可以挑出符合理想的材料,作为悬浮系进行扩增培养。(三)紫杉醇含量的检测现行的比较普遍有效的方法是利用薄层层析法,其大体过程是先将愈伤组织干燥,再用甲醇渗滤提取,获得提取液,经减压浓缩至干,用水:CHCl3取。合并CHCl3部分,再经减压浓缩获得粗提液,经薄层层析,收取喊紫杉醇和10-脱乙酰基巴卡丁-
后,峰II组份减少,峰I和峰III成分明显增加,峰I是集聚的标记生长激素,而峰III是不具有免疫活性的放射性化学杂质(图8--3)。 图8-3 125 I―HGH的Sephadex G-100过滤谱 实线:新鲜制备的 125 I―HGH 虚线:保存1个月的125 I―HGH 标记化合物的纯化方法,除制备比活度低而化学量又较多的标记物可用重结晶、蒸馏、萃取等常规方法外,一般需用微量分离技术,较方便的是层析法、离子交换法、凝胶过滤及高效液相层析法等。现以碘
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