实验进口试剂 崩溃酶，Driselase，实验进口试剂 崩溃

RNA Purification Protocol for 100-200 mg of Animal Tissue

设备   1. Centrifuge capable of 3,000-5,000 x g 2. High speed centrifuge tube with capacity of at least 15 ml 3. Ice bath 4. Ground pestle 实验步骤   1. Dissect tissue quickly and freeze in liquid nitrogen

一篇搞定 IP、co-IP 实验

糖，建议进行 Pre-clear；如果使用磁珠，此步可忽略 抗 X 抗体的轻链（25 kD）和重链（50 kD） 更侧重于如何在实验上进行优化（见下文） *注意：总蛋白上样量过多也会造成 非特异性结合，建议上样量为 500 ug-1 mg。上样之前一定要先用 BCA 定个量！定个量！定个量！ pre-clear：上样前先用裂解液过一遍柱子，减少基质本身对蛋白的吸附 Output：在某些 co-IP 实验中，实验人员会把IP后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测

免疫共沉淀实验指南

将其稀释至 1 mg/mL 以降低缓冲体系中去污剂的浓度（但对于那些在细胞中表达水平较低的蛋白而言，10 mg/mL 这样更高的浓度可能对免疫沉淀更有效一些）。 加入推荐体积的免疫沉淀抗体至 500 µL 细胞裂解液中与目标蛋白反应。（抗体的最适用量要根据每一细胞模型中免疫沉淀靶蛋白的数量来确定）。 将细胞裂解液与抗体轻轻混匀后孵育 2h，或 4℃ 缓慢振荡过夜。（选择孵育 2h 常用于免疫沉淀与激酶或磷酸酯酶作用的活化酶。）加入100 µL Agarose protein A+G 轻轻振荡 1h