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- 蛋白质组学，蛋白质化学技术服务
- 2025年12月31日
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北京农业生物检测实验室
- 服务名称：
多肽的一级序列检测 —— 技术服务
- 规格：
微信联系13241781249
多肽的一级序列检测——技术服务
————Edman法N末端序列分析
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公司技术服务项目汇总
| 项 目 名 称 | 单 价 | 备 注 |
| N末端测序（Edman） | —— | 活性,多肽,蛋白等 |
| N/C端测序（质谱法） | —— | 抗体，新蛋白等 |
| 全序列测定（Edman） | —— | 抗体，新蛋白等 |
| 全序列测定（质谱法） | —— | 抗体，新蛋白等 |
| 蛋白多肽全组分鉴定 | —— | 多肽，蛋白等 |
| 二硫键+Cys定位分析 | —— | 定位，数量分析 |
| 氨基酸定性定量分析 | —— | 20种或50种氨基酸 |
| 糖基化修饰分析(N糖) | —— | 修饰位点与数量 |
| 圆二色谱分析 | —— | CD 180-260nm |
| 等电点分析 | —— | 全柱成像毛细管电泳 |
| HPLC分析（多种技术） | —— | RPC,SEC,IEC,HIC,AC |
| HPLC制备（多种技术） | —— | 半制备柱 |
| 电泳制备转膜 | —— | 还原电泳 |
| 焦谷氨酸肽酶去Q环化 | —— | N端Q环化修饰 |
| 其他前处理————浓缩，脱盐，酸化处理，烷基化，酸水解等 | ||
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项目1 ：蛋白质/多肽/抗体的 N 端序列分析
Edman法N末端序列分析
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检测仪器: （总计4台套）
岛津 PPSQ-53A 蛋白多肽自动测序仪（1#）
岛津 PPSQ-33A 蛋白多肽自动测序仪（2#）
岛津 PPSQ-33A 蛋白多肽自动测序仪（3#）
岛津 PPSQ-31B 蛋白多肽自动测序仪（4#）
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主要应用:
1、抗体药物申报：抗体的 N 末端氨基酸序列情况判断
2、全序列测定：N末端连续 70 个以上氨基酸序列测定
3、应用领域：药物申报，生物药研发，海关检验，食品药品监测
4、其它应用：结构验证，酶切位点寻找，断点寻找，环化与否，半胱氨酸，二硫键判断，活性区域
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样品要求:
1、含量: 200 -1000 Pmol (15个AA--70个AA)
2、形式: PVDF膜；液体；干粉
3、封闭: N端未被封闭(如Q修饰，N端环化，甲酰化，乙酰化等)
4、干扰: 不能含有蛋白酶，氨基酸，胺，盐分，去污剂等
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提供信息:
1、样品来源: 表达重组，天然，合成等
2、样品含量: 浓度，含量（或者紫外吸收情况）
3、样品纯度：SDS或者HPLC及质谱图谱
4、制备方式: 简单提取流程，各步骤结果及图谱
5、样品溶解性：常规溶剂，难溶溶剂
6、其他:稳定性，毒性，腐蚀性；可能杂质，预测结构，分子量等
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项目2： 蛋白质/多肽等大分子的质谱分析
蛋白质、多肽、抗体等生物分子的质谱鉴定测序分子量等
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检测仪器:
基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱仪 MALDI-TOF-TOF
高性能定性定量质谱仪 AB Sciex Triple TOF 5600+
电喷雾组合型离子阱质谱仪 Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ MS
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检测对象:
1、抗体,融合蛋白质
2、合成小肽，天然活性小肽
3、酶解后的肽片段
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检测项目：
1、分子量精确测定； 6、二硫键定位检测
2、高通量蛋白鉴定； 7、半胱氨酸检测
3、 N 端序列测定； 8、肽段覆盖率
4、 C 端序列测定； 9、肽质量指纹图谱
5、多肽全序列测定；
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样品要求:
1、样品含量:50-1000 Pmol (根据检测项目而定)
2、样品形式:液体，干粉，胶粒/条带
3、纯度要求：95%以上
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客户提供信息:
1、来源: 天然,合成,表达(及其理论序列)
2、含量: 浓度,含量（或者紫外吸收情况）
3、溶解性：常规溶剂,难溶溶剂
4、特征：分子量,等电点,可能杂质,可能修饰,可能结构等
5、制备方式: 简单提取流程（SDS；HPLC；酶解；其他）
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项目3： 蛋白质/多肽的液相分离纯化
蛋白质、多肽、抗体等生物分子的分离纯化制备
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使用仪器:
快速蛋白纯化系统 ÄKTA Avant 25
快速蛋白纯化系统 ÄKTA Explorer100
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纯化对象:
1、天然蛋白质/多肽等
2、合成多肽/小肽等
3、具有活性的天然提取混合物
4、带标签的融合蛋白，抗体等
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纯化技术与条件：
1、离子交换——HiTrap HP柱,Mono柱,含Q,DEAE,ANX,S,SP,CM等填料
2、凝胶层析——Superdex 30/75/200柱，Hiprep 30/75/200柱等
3、亲和层析——His标签柱，GST标签柱，含分析制备级别
4、疏水层析——Phenyl，Butyl，Octyl各种填料柱子
5、反相层析——C3，C4，C8，C18各种填料的柱子
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样品要求:
1、样品含量:足量（根据后期研究需求而定）
2、样品形式:液体；干粉
3、室温稳定性好
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客户提供信息:
1、样品来源: 动物、植物、微生物；天然，合成或表达等
2、样品含量: 浓度，含量（或者紫外吸收情况）
3、样品溶解性：常规溶剂，难溶溶剂
4、目标物分子量，等电点，活性情况
5、制备方式: 简单提取流程，SDS或者LC及图谱
6、其他信息:稳定性，毒性，腐蚀性；可能杂质，预测结构等
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项目4： 高效液相色谱分析（HPLC）
蛋白质、多肽、代谢物等生物分子的HPLC分析
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检测仪器:
安捷伦高效液相 Agilent 1200 HPLC
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主要应用:
1、蛋白质/多肽的纯度鉴定
2、蛋白质/多肽的定量分析
3、天然/合成样品的纯度检测
4、蛋白质/多肽的指纹图谱分析
5、单糖/寡糖/多糖定性定量分析
6、混合物/粗提物分子量分布分析
7、代谢组分/小分子指纹图谱分析
8、蛋白/多肽/糖类的少量纯化制备
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样品要求:
1、样品含量: 50 Pmol-1000 Mmol (从ng分析到g级制备)
2、样品形式: 液体或干粉；纯品或混合物；
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客户提供信息:
1、样品来源: 表达，天然，合成；动物、植物、微生物等
2、样品含量: 浓度，含量（或者紫外吸收情况）
3、提取方式: 简单提取流程，各步骤结果及图谱
4、样品溶解性：常规溶剂，难溶溶剂
5、其他:稳定性，毒性，腐蚀性；可能杂质，预测结构，分子量等
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文献和实验1、Activation of sodium channel by a novel-scorpion toxin, BmK NT2, stimulates ERK1/2 and CERB phosphorylation through a Ca2+ dependent pathway in neocortical neurons
下载连接：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28591591
2、Cryo-EM structures of MERS-CoV and SARS-CoV spike glycoproteins reveal the dynamic receptor binding domains
下载连接：https://www.nature.com/articles/ncomms15092/
3、Activation of Aedes aegypti prophenoloxidase-3 and its role in the immune response against entomopathogenic fungi
下载连接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/imb.12318
4、Chemosynthesis and characterization of site-specific N-terminally PEGylated Alpha-momorcharin as a potential agent
下载连接：https://www.nature.com/articles/s41598-018-35969-1
单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs），指单个核苷酸碱基的改变，包括置换、颠换、缺失和插入，导致的核酸序列的多态性。在不同个体的同一条染色体或同一位点的核苷酸序列中，绝大多数核苷酸序列一致而只有一个碱基不同的现象，这就是SNP。SNP在人类基因组中数量较多，发生频率较高，因此被认为是继微卫星之后的新一代遗传学标记。 HRM检测SNP技术是依据在一定的温度范围内将PCR扩增的产物进行变性，期间实时检测体系内荧光信号。荧
S rRNA 的电泳和分析评估纯化的 RNA 的两个样品的完整性。（C）在凝胶上测定 DNA 片段化的效率和片段化 DNA 的分布。（M=分子量标准品。RNA 样品在变性凝胶上运行。） d. 检测混合样品中的目标序列 凝胶电泳是通过探针杂交检测核酸库中的靶序列的工作流程的关键部分（图 5，图 6）。其中，探针指的是具有已知序列的单链核酸，专用于通过碱基互补与目标序列结合。 对于 DNA 片段分析，Southern 印迹法和限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）分析是两种众所周知的技术，其中使用
就是以定量PCR为基础的，比如Taqman探针法、分子信标（Molecular beacon）和FRET（HybProbe），应用这一类方法时需要对突变位点背景很清楚，针对特定的突变位点设计并合成序列/位点特异性探针。 第二类是以分子杂交技术为基础的检测方法，如寡核苷酸连接分析（OLA）和动态等位基因特异性杂交（DASH），这几种方法也均涉及到序列特异性探针。 第三类是基于PCR技术与其它方法相结合的检测方法，如变性-高效液相色谱（DHPLC）、SSCP（单链构象多态性）、DGGE（变性
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N 端测序报告(重轻链)_英文版（电子版模式）.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00030——服务项目汇总.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00031——1个工作日项目（Edman）.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00005——N端测序介绍及样品要求.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00000—— 生物大分子表征.pdf 附 (下载 0 次)
BJTL00002——N端测序分析.pdf 附 (下载 0 次)
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