游离肉毒碱测试剂盒操作说明书

游离肉毒碱测试剂盒操作说明书
Carnitine(HY-50117)
　 肉毒碱（Carnitine）又叫维生素Bt，是一种类维生素，分子式C7H15NO3，分子量161.20。肉毒碱以游离型和结合型两种形式存在于血液中。肉毒碱在动物肝脏内利用精氨酸和赖氨酸及辅因子维生素C 为原料合成, 是机体脂肪酸进入线粒体内进行β 氧化的载体分子, 对线粒体内CoA 乙酰CoA 的比例起着调节作用, 与心肌梗死、慢性肾功能不全、肝硬化等疾病的关糸十分密切, 因而受到临床的广泛关注。
游离肉毒碱测试剂盒操作说明书检测原理：L-肉毒碱与乙酰辅酶A(CoA)在肉毒碱乙酰转移酶催化下，生成乙酰肉毒碱与辅酶A，辅酶A与5,5-双巯基-2-硝基苯酸（DTNB）反应生成5-巯基-2-硝基苯酸（TNB），在410nm下测定吸光度变化，生成量与含量成正比。
L-肉毒碱+乙酰CoA CAT 乙酰肉毒碱+CoA CoA+DTNB → TNB
试剂盒组成：
R1：显色剂 1瓶 R2：反应液（内含乙酰CoA）1瓶 R3：反应液（内含肉毒碱乙酰转移酶）1瓶
R4：标准品 1瓶 R5：标本处理液 A、B 2瓶
游离肉毒碱测试剂盒操作说明书操作步骤
标本前处理 单位（ul）
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总肉毒碱 游离肉毒碱
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血清 400 400
R5(A) —— 20
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孵育45分钟
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R5(B) 80 80
R5(A) 80 60
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离心 3000转/分钟 5分钟 取上清液待测
游离肉毒碱加样步骤 单位（ul）
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对照管 标准管 样本
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上清液 —— —— 50
标准品 —— 50 ——
R1： 50 50 50
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混匀 37度 孵育 2分钟
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R2： 25 25 25
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混匀 37度 孵育 3分钟
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R3： 30 30 30
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室温混匀 动态法 读取OD值 定标50
计算结果
以各标准管的单位浓度为横坐标，以各管透光度差值为纵坐标作图。（适用于分光光度计）
全自动或半自动生化仪直接读取数据
正常参考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：游离肉毒碱48.5±7.5umol/L
总肉毒碱 57±9.5umol/L
注意事项：
1. 样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准，准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断，内含叠氮钠，应避免直接接触皮 肤和眼睛，切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
游离肉毒碱测试剂盒操作说明书本试剂盒主要技术指标：
1、线性范围：0-70umol/L
2、精密度：批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10% 。