丙二醛测试剂盒操作说明书
MDA (HY-60003)KIT
丙二醛(Malondialdehyde,MDA)分子量72.0634,机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化酸。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡,氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试丙二醛的量可反应机体脂质过氧化的程度,间接的反应出细胞损伤的程度。
检测原理:过氧化脂质降解产物中的丙二醛(MDA)可与硫代酸(TBA)缩合,形成红色产物,在532nm处有最大吸收峰。
丙二醛测试剂盒操作说明书试剂盒组成:
标准品: 1瓶 浓度为35nmol/L
R1 (试剂1):缓冲液 1瓶
R2(试剂2):液体 1 瓶
R3 (试剂3):显色剂 1瓶
操作步骤:
MDA操作步骤 (单位ul)
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对照管 标准品管 样本
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样本 —— —— 50
水 50 —— ——
标准品 —— 50 ——
试剂1 400 400 400
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混匀,室温 ,20分钟
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试剂2 400 400 400
试剂3 300 300 300
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100℃ ,8小时, 样本3500转/10min 取上清 ,532nm 处 定标35 终点法,直接在分光光度计,半自动或全自动生化仪上直接读取OD值或数据
如果没有全自动生化仪或半自动生化仪,将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。(适用于分光光度计)
全自动或半自动生化仪直接读取数据,最终结果除5.
丙二醛测试剂盒操作说明书正常参考值:
各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:3.5-5.0 nmol/ml
结果除5后,为最终结果。(因准确度的问题,标准品及样本扩大5倍)
注意事项:
1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准,准确性高。因标准品及样本扩大5倍加样,故结果除5后,为最终结果。
3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
5. 试剂1,2和3需充分溶解混合后加入
丙二醛测试剂盒操作说明书 本试剂盒主要技术指标:
1、 线性范围:0-35nmol/ml
2、 精密度:批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10% 。
3、 灵敏度:<0.02nmol/ml