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心脏扩张肽试剂盒操作说明书

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  • YB-10050
  • 2025年07月06日
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      钰博生物

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    • 检测方法

      酶联免疫

    • 应用

      科研

    • 标记物

      见说明书

    • 样本

      血清/组织/尿液

    心脏扩张肽试剂盒操作说明书
    CDN HY-10050 RIA KIT
    心脏扩张肽(Cardiodilatin CDN)又名心肌扩张肽,心脏扩张素,是由16个氨基酸组成的小分子多肽,分子量为1828.82。CDN由心脏分泌,在心肌扩张等病理和刺激情况下与心钠素同时分泌,属于心钠素家庭成员之一,其受体存在于肾脏,动脉平滑肌、动脉内皮等。其应用范围:心脏功能不全、高血压、冠状动脉痉挛、不稳定心绞痛、严重心律失常、肾血管病变。在临床研究中可作为早期了解和预测心肌功能和心肌扩张受损状况的指标之一。因此监测心肌扩张肽在体内变化对于及时判断心血管疾病严重程度和发生、发展及采用相应治疗措施有重要意义。
    标本采集:
    1、采血前用抗凝剂肝素15国际单位/ml处理血样试管,干燥后保存备用。
    2、采血前试管内加放抑肽酶100ul/5ml血样,采血后立即置冰中,30分钟内4℃下
    2000转/分,离心15分钟取血清置-20℃待测,可保存3-6个月。
    药盒组成:
    1、CDN 抗体一瓶。 2、125I- CDN 标记一瓶。
    3、CDN 标准品一瓶。 4、缓冲液一瓶。
    5、分离剂(第二抗体)一瓶。 6、GARGG一瓶。
    心脏扩张肽试剂盒操作说明书 测定方法:
    CDN ­ RIA 操作程序 (单位:ul)
    ————————————————————————————
    试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
    ————————————————————————————
    缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
    标 准 品 —— —— —— 100 ——
    样 品 —— —— —— —— 100
    抗 体 —— —— 100 100 100
    ————————————————————————————
    摇匀,4℃ 24小时
    ————————————————————————————
    125I- CDN 100 100 100 100 100
    ————————————————————————————
    摇匀,4℃ 24小时
    ————————————————————————————
    GARGG 100 100 100 100 100
    ————————————————————————————
    摇匀,室温1.5小时
    ————————————————————————————
    分 离 剂 —— 500 500 500 500
    ————————————————————————————
    混匀,室温放置20分钟,4℃3500转/分 离心25分钟,去上清,测定沉淀cpm值。
    结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
    在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果,
    最后结果×2.5。
    心脏扩张肽试剂盒操作说明书 注意事项:
    1标准品用前加1ml缓冲液,取出10ul加放990ul缓冲液中,再取出0.5ml进行倍比稀
    释, 最后浓度分别为8、16、32、64、128pg/ml。
    本月药盒抗体用 ml缓冲液稀释
    本月药盒标记用 ml缓冲液稀释
    本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
    2、整个试验应尽量于4℃下进行。
    本月药盒参考数据:
    ————————————————————————————————
    T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
    ————————————————————————————————
    CPM
    ————————————————————————————————
    N/T% B0/T% B/ B0 %
    ————————————————————————————————
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    • 实验操作

      ,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

    • CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting

      %;2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA(按照基因组 DNA 提取试剂说明书操作);3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增,这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase,一切按照该酶的说明书严格操作;4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂回收 DNA 条带,一切按照胶回收试剂说明书进行操作;5. 回收后的 DNA 样本,经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA,部分结果如下:T7 EI验证成功,开始正式实验时间飞逝,上次说

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