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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
P-815
- 库存:
500
- 供应商:
镜像绮点
- 肿瘤类型:
肥大细胞瘤
- 细胞类型:
详见说明
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
肥大组织
- 相关疾病:
肥大细胞瘤
- 物种来源:
小鼠
- 免疫类型:
否
- 细胞形态:
上皮样细胞
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 器官来源:
肥大组织
- 运输方式:
冻存/复苏
- 年限:
长期
- 生长状态:
轻微贴壁生长
- 规格:
1ml/T25
细胞介绍
P815细胞吞噬小粒乳汁但不吞噬酵母聚糖或卡介苗。 没有抗体依赖的细胞毒作用。 硫酸右旋糖苷、LPS或PPD不能抑制细胞生长。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 在本库通过支原体检测。
细胞特性
1) 来源:小鼠 肥大细胞;肥大细胞瘤
2) 形态:悬浮,部分轻微贴壁生长。贴壁细胞可用刮刀刮下后继续培养
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。

一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备1640(推荐iCell-0002)基础培养基; 10%优质胎牛血清; 1%P/S.
注意事项:
1.复苏的P815活细胞收到之后,细胞多数呈悬浮状态,可能有些许细胞贴壁。请将全部细胞悬液转移到离心管,将剩下贴壁的细胞吹打脱壁后(刮刀刮下)一并收集,1000rpm离心5min,加入10-15ml培养液重悬后移植到2个T25培养瓶内培养。
2.传代周期:以20万细胞/ mL密度开始培养,并在培养过程中维持细胞密度在10万细胞/毫升到100万细胞/mL。
3.传代比例:以20万细胞/毫升密度开始培养,并在培养过程中维持细胞密度在10万细胞/ mL至100万细胞/ mL。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞,传代可以参考以下方法:
1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
业务范围



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文献和实验查询:www.icellbioscience.com/news/News/blog/1
一、效应细胞的制备激惹5天后,于无菌条件下取出受鼠引流的腹股沟淋巴结,100目钢网研磨,调整细胞浓度为2×107.ml-1。台盼蓝色要求存活率>95%。二、靶细胞的制备P815细胞株系DBA/2小鼠的肥大细胞瘤细胞株。连续传代培养,调整细胞浓度为2×105/ml或3.33×105/ml(加入α-Lyt2 mAb时的靶细胞浓度),台盼蓝染色成活率>95%。三、LDH释放法测定CTL的功能按表1加样于96孔培养板中,设3个复孔。混匀置二氧化碳培养箱中孵育4h。室温离心,用微量加样器每孔取
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