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透明质酸放免试剂盒操作说明书

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  • YB-10088
  • 2025年07月11日
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      钰博生物

    • 检测范围

      见说明书

    • 检测方法

      酶联免疫

    • 应用

      科研

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    • 样本

      血清/组织/尿液

    透明质酸放免试剂盒操作说明书
    HA(HY-10088)RIA Kit
    透明质酸(Hyaluronic Acid.HA)是一种广泛存在于细胞外基质中的高分子多糖,主要由肝内皮细胞进行降解,肝组织正常结构受到损伤时,一方面HA的合成增加,另一方面肝脏对HA的降解能力下降,导致血清中HA水平明显增高.并且增高的程度与肝组织炎症及纤维化程度呈正相关.
    急性肝炎、慢性活动性肝炎,肝硬化以及肝癌导致的血清HA水平增高,某些恶性肿瘤,肺心病患者的血清HA水平也会增高,慢性肝火在用干扰素或激素进行治疗时,伴有血清HA水平下调。
    胚胎儿血清HA极高,新生儿血清HA仍维持在较高水平,随着年龄增长血清HA逐渐降低,到中、老年又略有升高。
    血清HA水平是反映肝纤维化的重要指标,也用于抗纤维化药物治疗时的动态观察。
    试剂盒组成:
    1、HA标准品(液体)7瓶,浓度为0、25、50、100、200、400、800ng/mL。
    2、HA 抗体(绿色液体,HA结合蛋白抗体)1瓶。
    3、125I-HA(红色液体)1瓶。
    4、分离剂(第二抗体)1瓶,用前充分混匀。
    5、透明质酸结合蛋白(蓝色液体,HABP)。
    6、HA质控血清(冻干品)2瓶。
    样品收集:
    取静脉血分离血清,48小时内测量可在2-8℃密闭保存;超过48小时-20℃密闭冷冻保存,至少稳定2个月,但要避免反复冻融。
    透明质酸放免试剂盒操作说明书测定方法:
    HA RIA加样步骤 单位:ul
    ———————————————————————————
    试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
    ———————————————————————————
    S0 —— 150 50 —— ——
    标 准 品 —— —— —— 50 ——
    样品或质控 —— —— —— —— 50
    HABP —— —— 100 100 100
    125I-HA 100 100 100 100 100
    ——————————————————————————
    37℃水浴60分钟
    ——————————————————————————
    HA抗体 —— 100 100 100 100
    ——————————————————————————
    37℃水浴40分钟
    ——————————————————————————
    分 离 剂 —— 100 100 100 100
    ——————————————————————————
    充分混匀后,4℃放置20分钟, 3500转/分 离心15分钟,去上清,测沉淀cpm。
    结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对
    数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
    注意事项:
    本月药盒标记每瓶用 -------- ml缓冲液稀释
    本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
    透明质酸放免试剂盒操作说明书 本试剂盒主要技术参数:
    标准曲线范围:25~800ug/L。
    灵敏度:5.5ug/L。
    精密度:批内CV为10%,批间CV为 15% 。
    正常参考值::0 ~ 100 ng/ml,中老年测值略高,进食后血清测值高于空腹血。
    肝病、慢活肝>160 ng/ml ; 肝纤维化>250 ng/ml,
    本月药盒参考数据:
    ——————————————————————————————
    T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
    ——————————————————————————————
    CPM
    ——————————————————————————————
    N/T% B0/T% B/ B0 %
    ——————————————————————————————
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    • 实验操作

      ,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

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