热休克蛋白90α放免药盒操作说明书

热休克蛋白90α放免药盒操作说明书
HSP-90α（HY-10230） RIA KIT
热休克蛋白(ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ ,ＨＳＰ)是原核细胞和真核细胞在不良因素作用下所产生的一组特殊蛋白质，广泛存在于生物组织中。根据同源程度及分子量大小，可分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60及小分子HSP家族。HSP90 以是否含有丰富的谷氨酰胺片段而分为HSP90α和HSP90β两类,二者分别由730和724 个氨基酸组成,其同源性为84 % ,分别由不同基因编码,其中HSP90α基因位于14q32.3 ,包含11个外显子和10个内含子。HSP90α是细胞内最活跃的分子伴侣之一,广泛参与细胞的信号转导、激素应答及转录调控过程,对细胞在生理、病理及应激条件下的生存发挥了重要作用。在发生应激反应时,HSP90α可以和那些由于环境刺激而使自身构象发生改变的蛋白相互作用,保证蛋白进行适当的折叠并防止其非特异性聚集,从而维持细胞的正常活性。HSP90α能与多种癌基因和抑癌基因产物结合形成异源蛋白复合体,介导其构象成熟及转运,从而参与细胞转化过程。HSP90还在神经元的迁移以及肿瘤的转移中发挥了一定的作用。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液（PBS）1瓶。用时每瓶加蒸馏水至50ml..
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 HSP-90α抗体1瓶：用前充分摇匀
4、¹²⁵I- HSP-90α 1瓶：
5、HSP-90α标准品5瓶，浓度为10、20、40、80、160pg/ml

热休克蛋白90α放免药盒操作说明书测定方法：（非平衡法加样）
HSP-90α RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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¹²⁵I- HSP-90α 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

热休克蛋白90α放免药盒操作说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：5%。
2． 灵敏度：<1pg/ml。
3． 标准曲线范围：10~320pg/ml。
4． 批内变异系数：CVw<7.0 %。
5． 批间变异系数：CVw < 12.0% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
35.6±4.5pg/ml(n=25)。
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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