儿茶酚胺（3合1）说明书

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  • 2025年07月15日
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    • 供应商：

      钰博生物

    • 检测范围：

      见说明书

    • 检测方法：

      酶联免疫

    • 应用：

      科研

    • 标记物：

      见说明书

    • 样本：

      血清/组织/尿液

    儿茶酚胺（3合1）说明书

    试剂组成
    提取、酰化试剂
    BA1601 标准品A 0ng/ml(肾上腺素)；0ng/ml(去甲肾上腺素)；0ng/ml(多巴胺) 1×1ml
    BA1609 标准品A/B 2.5ng/ml(多巴胺) 1×1ml
    BA1602 标准品B 0.9ng/ml(肾上腺素)；4.5ng/ml(去甲肾上腺素)；10ng/ml(多巴胺) 1×1ml
    BA1603 标准品C 3ng/ml(肾上腺素)；15ng/ml(去甲肾上腺素)；40ng/ml(多巴胺) 1×1ml
    BA1604 标准品D 9ng/ml(肾上腺素)；45ng/ml(去甲肾上腺素)；160ng/ml(多巴胺) 1×1ml
    BA1605 标准品E 30ng/ml(肾上腺素)；150ng/ml(去甲肾上腺素)；640ng/ml(多巴胺) 1×1ml
    BA1606 标准品F 90ng/ml(肾上腺素)；450ng/ml(去甲肾上腺素)；2560ng/ml(多巴胺) 1×1ml
    BA1651 值控1 1×1ml
    BA1652 值控2 1×1ml
    BA1611 酰化缓冲液 1×20ml
    BA1612 酰化试剂 1×1.5ml
    BA1613 化验缓冲液 1×4ml 包含1M盐酸
    BA1617 提取缓冲液 1×4ml
    BA1618 提取盘 48个小孔，
    BA1619 盐酸 1×20ml（黄色）包含0.025M盐酸
    放射免疫测定试剂
    BA1614 铺酶 1×0.75ml
    BA1615 酶 2×1ml/瓶 干冻
    BA1616 酶缓冲液 1×4ml
    BA3030 分离剂 3×55ml 使用前请充分混合
    BA0110 肾上腺素抗血清 1×2.75ml 蓝色
    BA0120 125I-肾上腺素 1×3ml 活性＜100kbp 红色
    BA0210 去甲肾上腺素抗血清 1×2.75ml 黄色
    BA0220 125I-去甲肾上腺素 1×3ml活性＜100kbp 红色
    BA0310 多巴胺抗血清 1×2.75ml 绿色
    BA0320 125I-多巴胺 1×3ml活性＜100kbp 红色
    检测程序
    所有药盒中的试剂，在使用前应放置室温平衡。
    8.1溶解酶的准备
    重要：在每次试验前配制新的溶解酶试剂（按试验需要量配制）。把有“酶”标签的小瓶和1ml蒸馏水充分混合。将0.3ml铺酶加入到0.7ml酶缓冲液中。溶解酶的总体积为2.0ml.
    儿茶酚胺（3合1）说明书8.2样本的准备、提取和酰化
    所有药盒中的试剂，在使用前应放置室温平衡。每15ul标准品，值控1、2和尿液样本分别萃取。每600ul血浆样本萃取。
    推荐果断的复制。
    1. 吸取15ul标准品，15ul值控和15ul尿液样本分别放入各自的提取盘的小孔中。向这些容器加入500ul蒸馏水。吸取600ul血浆样本加入小孔中以便萃取肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺。（注意：应该在血浆中的多巴胺测定中，标准品要多加入标准品A/B）
    2. 吸取50ul检验缓冲液加入小孔中
    3. 吸取50ul提取缓冲液加入小孔中
    4. 用粘性金属箔覆盖容器并等待反映30min。在室温条件下，放在震荡器上（600-900r/min）
    5. 移走金属箔。立即将容器轻轻倒出并移走多余的液体。
    6. 吸取150ul酰化物缓冲液加入小孔。
    7. 吸取25ul酰化物试剂加入小孔。
    8. 在不加入金属箔的情况下等待反应15分钟，在室温环境中并放在震荡器上（600-900r/min）
    9. 立即把容器内的试剂轻轻倒出并移走多余液体（参见5）
    10. 吸取1ml蒸馏水加入到小孔中
    11. 在不加入金属箔的情况下等待反应15分钟，在室温环境中并放在震荡器上（600-900r/min）
    12. 立即把容器内的试剂轻轻倒出并移走多余液体（参见5）
    13. 吸取200ul盐酸（0.025M）加入到小孔中以便洗提儿茶酚胺。
    14. 用粘性金属箔覆盖容器并等待反映10min。在室温条件下，放在震荡器上（600-900r/min）
    警告：不要倒出浮在表面上的液体
    用于放射免疫鉴定的洗脱液体积量：
    肾上腺素
    去甲肾上腺素
    多巴胺
    100ul
    15ul
    75ul
    8.3肾上腺素的放射免疫鉴定
    在试管（聚苯乙烯）上作标记
    1. 吸取100ul盐酸加入到装有NSB的试管内
    2. 吸取100ul提取标准品、值控和病人样本加入不同的试管内
    3. 吸取25ul溶解酶加入到所有的试管内（除了总T管）
    4. 充分混合，37℃水浴30分钟
    5. 吸取50ul125I-肾上腺素标记加入到所有的试管
    6. 吸取50ul肾上腺素抗血清加入到所有试管中（除了总T管和NSB）
    7. 充分混合并使用离心分离机1分钟500xg
    8. 在室温情况下等待反应2小时，并震荡（400-500rpm）或者在2-8℃环境中等待反应15-20小时（过夜）
    9. 将充分混合冷却(2-8摄氏度)的分离剂,每根试管加入1ml分离剂（除了总T管），并混合
    10. 在2-8℃环境中反应15分钟
    11. 使用离心分离机工作15分钟3000xg，可能的话使用低温离心分离机。
    12. 将浮在表面的液体小心的轻轻倒出或吸出（除了总试管），使试管清洁并倒立2分钟。
    13. 使用√计数器将所有试管计数1分钟。
    儿茶酚胺（3合1）说明书8.4去甲肾上腺素的放射免疫鉴定
    在试管（聚苯乙烯）上作标记
    1. 吸取15ul盐酸加入到装有NSB的试管内
    2. 吸取15ul提取标准品、值控和病人样本加入不同的试管内
    3. 吸取25ul溶解酶加入到所有的试管内（除了总T管）
    4. 充分混合，37℃水浴30分钟
    5. 萃取50ul125I-去甲肾上腺素标记加入到所有的试管
    6. 吸取50ul去甲肾上腺素抗血清加入到所有试管中（除了总T管和NSB）
    7. 充分混合并使用离心分离机1分钟500xg
    8. 在室温情况下等待反应2小时，并震荡（400-500rpm）或者在2-8℃环境中等待反应15-20小时（过夜）
    9. 充分混合冷却的试剂,每根试管加入1ml（除了总T管），并混合
    10. 在2-8℃环境中反应15分钟
    11. 使用离心分离机工作15分钟3000xg，可能的话使用低温离心分离机。
    12. 将浮在表面的液体小心的轻轻倒出或吸出（除了总T管），使试管清洁并倒立2分钟。
    13. 使用√计数器将所有试管计数1分钟。
    8.5多巴胺的放射免疫鉴定
    1. 吸取75ul盐酸加入到装有NSB的试管
    2. 吸取75ul提取标准品、值控和病人样本加入不同的试管内
    3. 吸取25ul溶解酶加入到所有的试管内（除了总T管）
    4. 充分混合，37℃水浴30分钟
    5. 萃取50ul125I-多巴胺标记加入到所有的试管
    6. 吸取50ul多巴胺抗血清加入到所有试管中（除了总T管和NSB）
    7. 充分混合并使用离心分离机1分钟500xg
    8. 在室温情况下等待反应2小时，并震荡（400-500rpm）或者在2-8℃环境中等待反应15-20小时（过夜）
    9. 充分混合冷却的试剂,每根试管加入1ml（除了总T管），并混合
    10. 在2-8℃环境中反应15分钟
    11. 使用离心分离机工作15分钟3000xg，可能的话使用低温离心分离机。
    12. 将浮在表面的液体小心的轻轻倒出或吸出（除了总T管），使试管清洁并倒立2分钟。
    13. 使用√计数器将所有试管计数1分钟。
    参考值
    以下数值仅供参考，建议实验室制定自己的正常值
    肾上腺素
    去甲肾上腺素
    多巴胺
    尿
    ＜20ug/天（110nmol/天）
    ＜90ug/天（535nmol/天）
    ＜600ug/天（3900nmol/天）
    血浆
    ＜100pg/ml
    ＜600pg/ml
    ＜100pg/ml
    灵敏度
    肾上腺素
    去甲肾上腺素
    多巴胺
    尿
    0.3ng/ml
    1.5 ng/ml
    0.8 ng/ml
    血浆
    7.5 pg/ml
    37.5 pg/ml
    20 pg/ml

    儿茶酚胺（3合1）说明书

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