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酪酪肽放免试剂盒操作说明书

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  • YB-10184
  • 2025年07月10日
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      钰博生物

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      见说明书

    • 检测方法

      酶联免疫

    • 应用

      科研

    • 标记物

      见说明书

    • 样本

      血清/组织/尿液

    酪酪肽放免试剂盒操作说明书
    PeptideyyHY-10184 RIA KIT
    酪酪肽Peptideyy (PYY)是由36个氨基酸组成的胃肠肽类激素,它主要由分布于回肠及结肠粘膜的内分泌细胞即L细胞分泌, 是一种对多种组织有抑制功能的胃肠激素,对消化道动力、分泌、粘膜上皮增殖等均有重要调节作用,是非常重要的肠分泌和合成的激素,它能够抑制胰腺外分泌、抑制胃酸分泌和胃肠蠕动等。研究证实酪酪肽通过Y2受体发挥其生理功能,肥胖者酪酪肽3-36的激素水平低, PYY还存在于多种肿瘤组织中,对胰腺癌、结肠癌、Barrett食管腺癌、乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞有抑制作用,并且可以改善肿瘤患者的恶液质。酪酪肽的作用机制复杂,涉及肠神经系统、中枢神经系统和其他胃肠激素。
    标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
    该药盒主要应用范围:
    * 肥胖症及Ⅱ型糖尿病的研究;
    * 其它激素的研究
    酪酪肽放免试剂盒操作说明书药盒组成:
    1、Peptideyy抗体(冻干品) 1瓶。
    2、125I - Peptideyy(冻干品)2 瓶。
    3、Peptideyy 标准品(冻干品)6瓶 :4、8、16、32、64、128pg/ml
    4、缓冲液1瓶。
    5、PR分离剂。
    测定方法
    Peptideyy RIA 操作程序 (单位:ul)
    ————————————————————————————
    试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
    ————————————————————————————
    缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
    标 准 液 —— —— —— 100 ——
    样 品 —— —— —— —— 100
    抗 体 —— —— 100 100 100
    125I - Peptideyy 100 100 100 100 100
    ————————————————————————————
    充分混匀, 4℃ 放置18~24小时
    ————————————————————————————
    分 离 剂 —— 500 500 500 500
    ————————————————————————————
    混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测沉淀cpm值。
    酪酪肽放免试剂盒操作说明书 结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
    在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
    注意事项:
    本月药盒标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
    本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
    本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 ,两瓶混匀使用。
    缓冲液10ml,用前加蒸馏水稀释至50ml。
    本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)。
    本试剂盒主要技术参数:
    NSB:<5%
    标准曲线范围:4-128pg/ml
    灵敏度:0.05 pg/ml
    精密度:批内CV<5%,批间CV<10% 。
    正常参考值:4-128pg/ml
    本月药盒参考数据:
    ——————————————————————————————
    T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
    ——————————————————————————————
    CPM
    ——————————————————————————————
    N/T% B0/T% B/ B0 %
    ——————————————————————————————
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    • 实验操作

      ,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

    • CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting

      %;2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA(按照基因组 DNA 提取试剂说明书操作);3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增,这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase,一切按照该酶的说明书严格操作;4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂回收 DNA 条带,一切按照胶回收试剂说明书进行操作;5. 回收后的 DNA 样本,经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA,部分结果如下:T7 EI验证成功,开始正式实验时间飞逝,上次说

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