胰岛素样生长因子放免药盒说明书

胰岛素样生长因子放免药盒说明书
IGFⅠ（HY-10119）RIA KIT
胰岛素样生长因子（Human InsuIin-Like Crowth Factor, IGF ）于1957年由SaLmon和Daughaday发现,命名为生长价素（Somatomedin）。后经研究确认其结构与胰岛素相类似，具有生长调节作用，于1978年定名为IGF。IGF-1是由70个氨基酸残基组成的单链多肽，分子量7649，其1-29肽段顺序相似于胰岛素B链（B2-B30）顺序，42-62肽段顺序相似于胰岛素A链，其中间段明显区别于胰岛素原的连接肽区，为12肽，且结构差异较大。IGF-1具有促进生长发育、促进物质代谢、降低血糖及促进细胞分裂增殖的作用，与儿童发育异常代谢紊乱、糖尿病和肿瘤的发生发展关系密切。
测定盒组成：
1.标准品6瓶: 10、50、100、250、500、1000ng/ml (用前用缓冲液A 1.4 ml稀释). “0”标准为
标准品稀释液
2.缓冲液A 标记,缓冲液B各一瓶
3. IGF—I抗体 1 瓶；每瓶5/10ml.
4. 125—I GFI 2 瓶(每瓶用缓冲液B 5.6 ml稀释),标记物复溶后一次性使用。
5.免疫分离剂(第二抗体)：1瓶；
6、质控血清：2瓶。临用前加缓冲液B1.4l复溶，略静置并混匀，复溶后一次性使用。
胰岛素样生长因子放免药盒说明书样品准备：
本系统采用血清标本,标本检测前标本用生理盐水10倍稀释 (或见注意事项后的样品提取).
待测血清须空腹，静脉取血即可。
样本最好进行提取，可避免胰岛素样生长因子结合蛋白的干扰。（见注意事项后的标本提取方法）

实验步骤：

IGF-I 操作步骤
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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蒸 溜 水 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- IGFI 100 100 100 100 100
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混匀，4℃15-24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置30分钟后，3600 转/分 离心20分钟，去上清，测定沉淀cpm值。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。结果×10.为最终结果。注：结果×10..
胰岛素样生长因子放免药盒说明书 注意事项：
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
样品提取(推荐使用)：
1、取血清样品0.1ml, 加酸/乙醇（95%乙醇：2M HCL=87.5:12.5）0.4ml，充分混匀，置室
温30分钟，4℃离心3000转/分，30分钟。
2、离心后的取上清0.2ml加0.855M Tris液0.2ml,混匀，置4℃30分钟，4℃离心3000 转/分，20分钟。
3 、取上清100ul 待测。
本试剂盒主要技术指标：
１、 NSB：<5%。
２、 灵敏度：<1ng/ml。
３、 标准曲线范围：10-1000ng/ml
４、 批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、正常参考值：180.5 ±40.2ng/ml。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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