消脂素放免试剂盒操作说明书

消脂素放免试剂盒操作说明书

Leptin （HY-10075） RIA KIT

消脂素（Leptin）是一种相对分子量约为16000 D的脂肪组织源激素，作为脂肪组织和中枢神经系统间网络联系的外周信号，可能通过血脑屏障作用于中枢神经系统。其生物学作用：影响摄食行为和调整自主系统活动，参与保持机体脂肪量恒定的自稳调节机制，其分泌呈昼间节律。目前有研究证明，胰岛素对消脂素浓度起决定的调节作用，直接抑制皮质醇释放，并具有刺激产热、氧耗和减轻体重的作用，并与甲状腺轴有互动作用。Leptin增加，可导致T3水平增加和T4水平降低。有学者观察到，哺乳期妇女的Leptin降低而怀孕期水平升高，表明：生殖系统激素很可能参与Leptin的体内生物合成的调节。

药盒主要应用范围：

* 肥胖症及Ⅱ型糖尿病的研究；

* 心血管疾病（冠状动脉硬化）、脑血管疾病(脑血栓、脑梗塞）的病理研究；

消脂素放免试剂盒操作说明书药盒组成：

1、Leptin标准品（冻干品）7瓶 :0、A、B、C、D、E、F，每瓶加2ml生理盐水溶解，其对应浓度分别为：0、1.25、2.5、5、10、20、40ng/ml。（标准品溶解后分装，保存在-20℃，避免反复冻融）。

2、¹²⁵I-LEP标记物：1瓶，冻干品。

3、LEP抗体：1瓶，冻干品。（兰色，兔）

4、缓冲液：1瓶，溶液。

5、二抗分离剂：1瓶，溶液，使用前必须充分摇匀。

标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。

测定方法：

Leptin RIA 操作程序 （单位：ul）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₆ 样 品

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缓 冲 液 —— 300 —— —— ——

标 准 液 —— —— 200 200 ——

样 品 —— —— —— —— 200

抗 体 —— —— 100 100 100

²⁵I -Leptin 100 100 100 100 100

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充分混匀， 2～8℃ 温育20小时以上

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 离心20分钟，去上清，测沉淀cpm值。

结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。

消脂素放免试剂盒操作说明书注意事项：

本月药盒标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）。

本试剂盒主要技术参数：

NSB：≤7%

零管结合率（B0/T）：≥20%。

标准曲线范围：0.3~110ng/ml

灵敏度：0.15ng/ml

精密度：批内CV≤10%,批间CV≤15% 。

准确性：回收率是90～110%

正常参考值：仅供参考,请各实验室建立自己的正常值.

空腹血清的正常参考值为：

男性：3.21～10.69 ng/ml

范围:1.45～15.19 ng/ml

女性: 9.79～21.09ng/ml

范围:6.00～29.63 ng/ml

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